去甲斑蝥素對梗阻性腎病Wnt-β-catenin表達的影響.pdf

1、目的:
　　建立大鼠單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)及人近端腎小管上皮細胞(HK-2)纖維化模型，1.檢測不同梗阻時間UUO大鼠腎β-catenin表達情況，明確β-catenin在腎臟表達的最佳時間點;2.用不同濃度NCTD干預(yù)UUO大鼠和TGF-β1刺激的HK-2細胞，探討NCTD對β-catenin、wnt4表達的作用;
　　方法:
　　1.動物實驗:分兩批:第一批16只大鼠，分空白組、UUO3天組、UUO7天組、UUO

2、14天組;第二批16只大鼠，分空白組、UUO14天組、NCTD(0.05mg/kg)干預(yù)組、NCTD0.1mg/kg干預(yù)組;
　　2.細胞實驗:分對照組、TGF-β15ng/ml刺激組、TGF-β15ng/ml刺激+NCTD2.5mg/L干預(yù)組、TGF-β15ng/ml刺激+NCTD5mg/L干預(yù)組;
　　3.免疫組織化、Western blot檢測β-catenin、Wnt4蛋白表達情況;
　　4.RT-PCR檢測β

3、-catenin、Wnt4 mRNA表達情況。
　　結(jié)果:
　　1.隨著UUO大鼠梗阻時間延長，β-catenin蛋白表達逐漸升高，UUO14天表達最強。
　　2.與UUO大鼠組相比，NCTD組β-catenin、wnt4蛋白及mRNA表達下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.TGF-β1刺激的HK-2細胞組較空白組β-catenin、wnt4蛋白表達上調(diào);與TGF-β1組相比，NCTD不同濃度干預(yù)組β-cateni