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1、研究目的:本實(shí)驗(yàn)以雄性Wistar大鼠為研究對(duì)象,通過(guò)動(dòng)態(tài)觀察造模后低功率激光照射過(guò)程中跟腱超微結(jié)構(gòu)、羥脯氨酸含量、Collagen-Ⅰ、TGF-β1基因表達(dá)的情況,從組織形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等幾個(gè)方面對(duì)跟腱進(jìn)行綜合的研究,以探討低功率激光照射對(duì)末端病大鼠跟腱所起的作用和影響。
研究方法:本實(shí)驗(yàn)采用了電刺激跳躍造模法和激光照射法。雄性Wistar大鼠96只,隨機(jī)分為:空白對(duì)照組(n=8)和電刺激造模組(n=88),
2、電刺激造模組又分為:①造模對(duì)照組(n=8)②自然愈合組(n=40),按取材時(shí)間點(diǎn)不同分為:1天組、2天組、3天組、7天組、14天組,每組8只。③激光照射組(n=40),按取材時(shí)間點(diǎn)不同分為:造模后1天照射組、2天照射組、3天照射組、7天照射組、14天照射組,每組8只。電刺激造模組的大鼠進(jìn)行5周的電刺激跳躍訓(xùn)練之后,對(duì)激光照射組的大鼠跟腱按要求進(jìn)行激光照射。測(cè)試方法與指標(biāo):①HE染色觀察大鼠跟腱內(nèi)膠原纖維的結(jié)構(gòu)變化。②樣本堿水解法測(cè)定跟腱
3、內(nèi)羥脯氨酸含量。③實(shí)時(shí)定量PCR方法測(cè)定跟腱內(nèi)Collagen—Ⅰ mRNA、TGF-β1mRNA的表達(dá)情況。
研究結(jié)果:①經(jīng)過(guò)3天的激光照射,照射組的羥脯氨酸含量、Ⅰ型膠原基因表達(dá)、TGF-β1基因表達(dá)與造模對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05),并且與同一時(shí)間點(diǎn)的自然愈合組比較也無(wú)顯著性差異(P>0.05)。②激光照射7天時(shí),激光照射組與造模對(duì)照組比較,Ⅰ型膠原基因表達(dá)顯著升高(P<0.05),羥脯氨酸含量、TGF-
4、β1基因表達(dá)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。而Ⅰ型膠原、TGF-β1基因表達(dá)顯著高于同一時(shí)間點(diǎn)的自然愈合組(P<0.05)。③激光照射14天時(shí),與造模對(duì)照組比較,激光照射組的羥脯氨酸含量、Ⅰ型膠原基因表達(dá)顯著升高(P<0.01),TGF-β1基因表達(dá)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。與自然愈合組比較,激光照射組的羥脯氨酸含量有顯著性差異(P<0.05),Ⅰ型膠原基因、TGF-β1基因表達(dá)有非常顯著性差異(P<0.01)。
研究結(jié)
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