HMGB1對高糖誘導(dǎo)的小鼠心臟成纖維細胞TGF-β1、COLLAGEN Ⅰ表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察高糖對小鼠心臟成纖維細胞HMGB1表達的影響，及抑制HMGB1后對高糖引起的小鼠心臟成纖維細胞TGF-β1、collagenⅠ表達的影響。
　　 方法:(1)酶消化法分離小鼠心臟成纖維細胞，差速貼壁法去除心肌細胞。波形蛋白免疫細胞化學染色鑒定成纖維細胞。(2)高糖(25mmol/l)誘導(dǎo)細胞。(3)將HMGBlsiRNAs和陰性對照通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑RNAiMAX轉(zhuǎn)染到心臟成纖維細胞中。(4)qRT-PCR檢測細胞HM

2、GB1、TGF-β1、collagenⅠmRNA表達，Westernblot檢測HMGB1蛋白表達，ELISA檢測細胞上清中的TGF-β1、collagenⅠ蛋白濃度。
　　 結(jié)果:(1)使用酶消化法和差速貼壁法獲得的高純度細胞符合成纖維細胞的形態(tài)特征并且波形蛋白免疫細胞化學染色陽性(2)高糖誘導(dǎo)6小時后成纖維細胞的HMGB1表達即上升。高糖導(dǎo)致TGF-β1和collagenⅠ的表達上調(diào)。抑制HMGB1的表達（基因沉默）能夠抑制

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