中國對蝦(Fenneropenaeus chinensis)主要過敏原的鑒定與分析.pdf

1、浙江工商大學(xué)研究生論文DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniVersityforMaster’sDegreeofEngineeringIdentificationandanalysisofm句oralergensinchineseshrimp，F(xiàn)enneropenc【e銳schinensisAuthor：YayunLiangMajor：FoodScienceandEngineeringSu

2、peI、risor：ProfLinglinFu浙鱸z角矢乎ZHEJlANGGONGSHANGUNlV蘭RSlTYDec2015CollegeofFoodScienceandBiotechnologyEngineering，ZhejiangGongshangUniVers時Hangzhou，31OO18，PRChina浙江工商大學(xué)研究生論文行Mascot數(shù)據(jù)庫搜庫，得到兩種不同的蛋白，分別為402kDa，等電點分別為6O和62的精氨酸激酶

3、和分子量為358kDa，等電點為46的原肌球蛋白，并得到這兩種蛋白的氨基酸序列。經(jīng)過與其他物種的過敏蛋白的氨基酸序列對比，發(fā)現(xiàn)這兩種蛋白分別與甲殼類動物的精氨酸激酶和原肌球蛋白的同源性高達95％以上，說明實驗鑒定的中國對蝦中的精氨酸激酶和原肌球蛋白是引起過敏的過敏原，而分析得到的兩種不同等電點的精氨酸激酶，認為可能存在不同蛋白質(zhì)修飾的同工酶，造成其存在等電點不同的蛋白點；3采用鹽析的方法將中國對蝦中的原肌球蛋白分離出來，將其純化得到純度

4、較高的原肌球蛋白，通過SDSPAGE和質(zhì)譜鑒定，發(fā)現(xiàn)電泳圖中主要為36kDa的蛋白條帶，純度為95％以上，質(zhì)譜鑒定出這與之前鑒定出來的原肌球蛋白相似度達到90％。最后用過體外細胞致敏模型對其性質(zhì)進行分析。經(jīng)過溫度、pH等條件的變化，并模擬胃腸道消化后，在P815肥大瘤細胞模型中分析其活性，發(fā)現(xiàn)原肌球蛋白是一種耐熱、耐酸的蛋白，能一定程度上被胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶降解，降低其致敏性，但不能完全使其失去活性。關(guān)鍵詞：中國對蝦；雙向