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文檔簡(jiǎn)介
1、 [目的] 通過建立食物過敏模型,確立并優(yōu)化sIgE和組胺定向釋放的檢測(cè)方法,為臨床提供可替代皮內(nèi)試驗(yàn)的持異、靈敏、安全的多過敏原體外診斷過敏癥技術(shù),并為重組表達(dá)過敏原,實(shí)現(xiàn)過敏原的標(biāo)準(zhǔn)化作前期研究。
[方法] 制備牛奶、蟹和鱉等幾種常見的食物過敏原,建立食物過敏癥動(dòng)物模型,間接ELISA法檢測(cè)抗血清中特異性IgE和IgG水平,熒光法測(cè)定致敏腹腔肥大細(xì)胞的組胺定向釋放,免疫印跡分析過敏原的過敏組分,飽和硫酸銨分段赫析法分離純
2、化過敏組分。
[結(jié)果] 用乳清蛋白和蟹蛋白免疫BALB/c小鼠成功建立了食物過敏模型,模型組小鼠血清sIgE和組胺水平均比對(duì)照組明顯升高。用氫氧化鋁作佐劑,以皮下注射途徑免疫小鼠獲得了理想的免疫效果。連續(xù)兩代用不含牛奶或奶制品的特制飼料飼養(yǎng)的小鼠sIgE水平低,顯示了特制飼料對(duì)過敏模型構(gòu)建的重要性。激發(fā)后第14d的定向組胺釋放率顯示組胺的測(cè)定與sIgE檢測(cè)結(jié)果具有良好的一致性。
[結(jié)論] 腹腔肥大細(xì)胞體外定向組胺釋放
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