葉酸代謝相關(guān)基因的多態(tài)性與圓錐動(dòng)脈干畸形的關(guān)聯(lián)研究;ALDH2基因型對(duì)圓錐動(dòng)脈干畸形患者心臟直視手術(shù)后心肌保護(hù)效果的影響.pdf

1、第一部分葉酸代謝相關(guān)基因的多態(tài)性與圓錐動(dòng)脈干畸形的關(guān)聯(lián)研究
　　 背景：葉酸在胚胎發(fā)育過程中起重要作用，心血管系統(tǒng)的正常發(fā)育也與機(jī)體葉酸水平密切相關(guān)。參與葉酸代謝的酶和載體蛋白對(duì)機(jī)體正常葉酸水平的維持至關(guān)重要。編碼這些蛋白基因的多態(tài)性可以改變這些酶和載體蛋白的功能，漢族人群中關(guān)于這些基因多態(tài)性與圓錐動(dòng)脈干畸形產(chǎn)生的關(guān)聯(lián)研究目前較少見。
　　 方法與結(jié)果：本研究選擇葉酸代謝途徑相關(guān)基因中的8個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行分析，觀察它們與

2、先天性心臟病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性，這些候選基因?yàn)椋?，10-亞甲基四氫葉酸還原酶基因(MTHFR)，亞甲基脫氫酶基因(MTHFD1)，運(yùn)鈷胺素蛋白基因(TCN2)，還原葉酸載體基因(RFC)，煙酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶基因(NNMT)和利鈉肽前體A基因(NPPA)。在單個(gè)位點(diǎn)的分析中，我們發(fā)現(xiàn)MTHFR基因rs1801133C＞T位點(diǎn)的基因型頻率分別為：先天性圓錐動(dòng)脈干心臟畸形組，CC18.4％，CT50.4%，TT31.1%;對(duì)照組，CC31

3、.6%，CT52.9%，TT15.4%。基因型頻率差異有顯著性(P=0.001)。Logistic回歸分析顯示，如果以MTHF基因rs1801133CC純合子基因型為參照組，攜帶TT變異純合子的個(gè)體患先天性心臟病的幾率增加到3.46倍（調(diào)整后的OR值=3.46:95%可信區(qū)間：1.83-6.55）。如果以RFC基因rs1051266GG純合子基因型作為參照組，則攜帶GA遺傳變異雜合子的個(gè)體患先天性心臟病的幾率增加到1.68倍(OR=1.

4、68;95%可信區(qū)間：1.02-2.78)。將所有圓錐動(dòng)脈干畸形患者按疾病診斷進(jìn)行分層分析，在顯性模型和隱性模型比較分析中，攜帶MTHFR基因rs1801133C＞T位點(diǎn)純合子基因型的患法洛氏四聯(lián)癥和大動(dòng)脈轉(zhuǎn)位的風(fēng)險(xiǎn)都增加。與野生純合子相比，攜帶RFC基因rs1051266位點(diǎn)GA基因型會(huì)顯著增加罹患大動(dòng)脈轉(zhuǎn)位的風(fēng)險(xiǎn)；OR=2.04;95%可信區(qū)間：1.18-3.73。在顯性模型分析中，RFC基因rs1051266位點(diǎn)GA/AA基因型比

5、GG純合子基因型更易患大動(dòng)脈轉(zhuǎn)位，差異具有顯著性；OR:=1.83;95%可信區(qū)間：1.04-3.24。
　　 結(jié)論：攜帶MTHFR基因rs1801133位點(diǎn)C＞T多態(tài)性改變和RFC因rs1051266位點(diǎn)G＞A多態(tài)性改變可能會(huì)增加先天性圓錐動(dòng)脈干心臟畸形的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　 第二部分線粒體乙醛脫氫酶2基因型對(duì)圓錐動(dòng)脈干畸形患者心臟直視手術(shù)后心肌保護(hù)效果的影響
　　 背景：線粒體乙醛脫氫酶2(ALDH2)酶活性與心

6、肌保護(hù)的結(jié)果成正相關(guān)，攜帶ALDH2*2等位基因會(huì)顯著降低ALDH2酶活性，東亞人群中有約40%的人攜帶ALDH2*2等位基因，ALDH2*2等位基因型對(duì)人體心肌保護(hù)的影響尚未研究，本研究擬評(píng)估ALDH2*2基因型對(duì)先天性心臟病心臟直視手術(shù)后患者心肌保護(hù)效果的影響。
　　 方法與結(jié)果：本研究分兩部分。第一部于體外循環(huán)前收集紫紺和非紫紺先天性心臟病患者右心耳組織進(jìn)行檢測（每組20例），以確定ALDH2*2基因型對(duì)代謝重構(gòu)的影響。第

7、二部分前瞻性入選一組法樂氏四聯(lián)癥行心臟直視手術(shù)的患者（N=118例，收集術(shù)中切下的心肌組織和術(shù)后臨床指標(biāo)，觀察ALDH2*2基因型對(duì)心臟直視術(shù)后心肌保護(hù)結(jié)果的影響。所有的心肌組織均在心臟停博后獲取。檢測組織ALDH2酶活性，氧化應(yīng)激指標(biāo)，谷胱甘肽含量，和活化轉(zhuǎn)錄因子4等的表達(dá)水平。患者基因分型和分組后，比較ALDH2*2攜帶者和非攜帶者所有實(shí)驗(yàn)和臨床結(jié)果。第一部分心耳組織
　　 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：非紫紺組ALDH2*2非攜帶者和攜帶者A

8、LDH2酶活性、GSH含量、組織4-HNE加成產(chǎn)物和MDA水平分別為：2.58土0.71和1.11±0.25U/mg，1.29±0.45和1.25±0.23nmol/mg,1.14±0.59和1.54±0.65ug/mg,70.17±35.19和93.90±51.66nmol/mg;紫紺組ALDH2*2非攜帶者和攜帶者ALDH2酶活性、GSH含量、組織4-HNE加成產(chǎn)物和MDA水平分別為：1.56±0.34和0.70±0.15U/mg,

9、1.14±0.32和2.35±0.40nmol/mg,1.73±0.75和2.83±0.77ug/mg，77.31±40.01和264.13±116.97nmol/mg。ALDH2*2等位基因型和紫紺均對(duì)ALDH2酶活性有著顯著影響(P=0.01和P＜0.01)。紫紺型ALDH2*2基因攜帶者蓄積大量毒性醛類物質(zhì)，過量的醛類物質(zhì)蓄積增加了活化轉(zhuǎn)錄因子4的表達(dá)水平，最終使ALDH2*2攜帶者心肌組織谷胱甘肽含量升高(P＜0．01)。第二部

10、分研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在心臟直視手術(shù)時(shí)，不同基因型患者之間ALDH2酶活性差別消失(ALDH2*2攜帶者：0.58±0.30U/mg;ALDH2*2非攜帶者：0.61±0.33U/mg;P=0.935),ALDH2*2攜帶者因?yàn)榻M織谷胱甘肽含量較高，術(shù)后心肌保護(hù)效果更好：術(shù)后肌鈣蛋白I水平較低(校正尸值=0.026)，正性肌力藥的使用也更少(校正尸值=0.001)，術(shù)后住院時(shí)間和ICU時(shí)間更短（校正尸值分別為0.009和0.023）。