葉酸代謝酶相關基因多態(tài)性與結直腸癌易感性的關聯(lián)研究.pdf

1、目的： 本研究應用以非配對的病例.對照研究，了解葉酸代謝酶基因多態(tài)性在人群中的分布頻率及其在群體水平上與結直腸癌易感性的關系，分析葉酸代謝酶基因一基因交互作用，以及基因多態(tài)性與相關環(huán)境暴露因素以及葉酸代謝相關營養(yǎng)素之間的交互作用與結直腸癌易感性的關系。 材料與方法： 1.關聯(lián)研究中，研究對象包括300例結直腸癌患者和300例非癌癥對照，病例采病例來源于2003年1月至2005年6月期間在本溪地區(qū)鋼鐵集團公司總醫(yī)院

2、住院治療的結直腸癌患者，對照來源于總醫(yī)院的同期住院病人，對病例與對照組人群的性別、年齡等因素進行頻數(shù)匹配。 2.通過流行學問卷調查獲得現(xiàn)場資料。調查內容包括：一般狀況，生活方式與習慣，飲食習慣與種類以及既往疾病史等。通過詢問各類食物的單次攝入量和攝入頻率獲得常見食物攝入量信息。 3.每位研究對象同時抽取5ml外周血。采用Promage Winzard Genomic DNAExtract提取外周血有核細胞DNA；采用聚合

3、酶鏈.限制性片斷長度多態(tài)性方法檢測MTHFRC677T、A1298C、MTRA2756G、MTRRA66G和TS3’-UTR、TS5’-UTR多態(tài)位點。CBS844ins68多態(tài)位點檢測采用PCR方法擴增目的片段后直接經瓊脂糖凝膠電泳分析。 4.統(tǒng)計分析。分類變量在病例組和對照組的分布特征采用X2檢驗：采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件的非條件Logistic回歸模型計算各基因型與結直腸癌風險的相關性，分析時對性別、年齡、吸煙、飲酒等

4、混雜因素進行分層，結果經性別、年齡、文化程度、腫瘤家族史、吸煙和飲酒等因素校正。采用卡方趨勢檢驗判斷是否存在劑量—反映關系，采用相乘模型來判斷基因一基因和基因一環(huán)境之間是否存在交互，同時采用似然比檢驗來分析總的交互模型是否有意義。 結果： 1.相關環(huán)境暴露因素與結直腸癌 1.1大學及以上文化程度、家族腫瘤史是結直腸癌的危險因素。 1.2飲酒年限與結直腸癌發(fā)病風險有關；吸煙程度與結直腸癌發(fā)病風險有關。被動吸

5、煙者結直腸癌風險有統(tǒng)計學意義的升高。無吸煙史，但有飲酒史者，個體患結直腸癌的風險顯著升高，OR值為1.69。 1.3膳食因素中：視黃醇、維生素C、總膳食纖維等營養(yǎng)素，水果、豆制品和綠葉蔬菜類食物包括花菜、白菜類和大蒜類食物，鉀攝入對結直腸癌均表現(xiàn)出較強的保護效應；中等MUFA攝入組個體患結直腸癌的風險顯著升高。 2.葉酸代謝酶基因多態(tài)與結直腸癌 2.1 MTHFR-677CT/1298AC組合基因型發(fā)生結直腸癌的

6、風險增加。 2.2 MTRR-66AG、MTRR-66GG和MTRR-66 G等位基因型發(fā)生結直腸癌的風險增加。 2.3 TS5’-UTR2R/2R基因型發(fā)生結直腸癌的風險下降，OR值為0.35。 3.基因-基因交互作用與結直腸癌 3.1 MTHFRC677T與MTRR A66G基因之間存在負交互作用，交互作用產生的ORint=0.46，似然比檢驗P=0.046。在MTHFR-677CC基因型的個體中，M

7、TRR-66 AG或GG基因型發(fā)生結直腸癌風險增加，OR為2.84，在MTHFR-677 CT或TT等位基因型的個體中，MTRR-66AA基因型發(fā)生結直腸癌風險增加，OR為1.93，MTRR-66AG或GG等位基因型發(fā)生結直腸癌風險增加，OR為2.34。 3.2在MTR-2756AA基因型的個體中，攜帶MTRR-66 AG或GG基因型者發(fā)生結直腸癌風險增加，OR為1.62。 3.3在MTRR-66AG或GG基因型的個體中

8、，攜帶TS5’-UTR3Rg/3Rg基因型者發(fā)生結直腸癌風險增加，OR為3.24。 3.4 TS5’-UTR3Rg/3Rc+3Rg/2R+3Rc/2R+2R/2R+3Rc/3Rc組合基因型合并TS3’-UTR ins6等位基因攜帶者患結直腸癌的風險有一定程度下降，OR值為0.47。 4.基因-環(huán)境交互作用與結直腸癌 4.1吸煙-基因與結直腸癌：MTRR A66G基因多態(tài)與吸煙對結直腸癌發(fā)生的風險表現(xiàn)出明顯的協(xié)同作

9、用。在不吸煙者中，66G等位基因攜帶者發(fā)生結直腸癌的風險增加，OR為1.72；而在吸煙者中，66G等位基因攜帶者發(fā)生結直腸癌的風險增加，OR為2.08。MTRR A66G基因型與吸煙之間存在負交互作用。吸煙程度與MTHFR C677T、A1298C，MTR A2756G，MTRRA66G,TS5’-UTR和TS3’-UTR基因之間均存在交互作用。以不吸煙者為參照組，吸煙<16包年者中，MTHFR-677 T等位基因型患結直腸癌的風險增加

10、2.09，MTRR-66 G等位基因型患結直腸癌的風險增加，OR為2.91；而在吸煙≥16包年者中，MTHFR-1298AA基因和TS3’-UTR de16/de16基因型者患結直腸癌的風險明顯下降，OR值分別為0.37和0.17。MTRR A66G基因型與吸煙年限之間存在負交互作用，在吸煙年限小于26年者中，MTRR-66G等位基因型者患結直腸癌的風險增加，OR為4.55。 4.2飲酒-基因與結直腸癌：MTRR A66G多態(tài)與

11、飲酒之間存在正交互作用。MTHFR C677T、MTR A2756G、MTRRA66G與飲酒年限之間存在負交互作用，而MTHFR A1298C和TS5’-UTR與飲酒年限之間存在正交互作用。飲酒年限<20年者，MTRR-66G等位基因型發(fā)生結直腸癌的風險增加，OR為3.98；而飲酒年限≥20年者，MTHFR-677AA、1298AA基因型發(fā)生結直腸癌的風險下降，OR值分別為0,24和0.58。 4.3飲酒-吸煙-基因與結直腸癌：

12、在飲酒的人群中，吸煙者并MTHFR-677T等位基因發(fā)生結直腸癌的風險增加，OR為4.61，吸煙者并MTRR-66G等位基因型發(fā)生結直腸癌的風險增加，OR為4.06。 5.基因-膳食交互作用與結直腸癌 5.1 MTHFRC677T與VitB12、蛋氨酸之間存在交互作用，ORint分別為1.07和1.12。在高VitB12和蛋氨酸中、高攝入組中，677CC和677T等位基因攜帶者患直腸癌的風險顯著下降。在VitB2中等攝入

13、和葉酸高攝入組中，MTHFR-677T等位基因型發(fā)生結直腸癌的風險顯著下降。 5.2 MTHFR A1298C與VB12、葉酸攝入之間分別存在交互作用，在VB12高攝入組中，1298AA、AC或CC基因型者結直腸癌的風險均顯著下降。 5.3 MTRA2756G在高VitB12攝入水平組中，AA、G等位基因發(fā)生結腸癌的風險顯著下降。 5.4 MTRRA66G與VitB2、煙酸、VitB6、葉酸和蛋氨酸之間分別存在正

14、交互作用，ORint分別為1.46、1.29、1.19、1.10和1.07，與VitB12攝入之間存在負交互作用，ORint為0.79。低和高VitB12攝入組，葉酸、蛋氨酸高攝入組中，66G等位基因攜帶者患直腸癌的風險顯著下降，在高VitB12攝入組中，66AA基因型患結直腸癌的風險顯著下降。 5.5 TS3'-UTR多態(tài)和VitB12攝入之間存在交互作用，ORint為0.70，在高VitB12攝入組中，TS3'-UTR de

15、16/de16和ins6等位基因發(fā)生結直腸癌的風險顯著下降。 5.6 TS5'-UTR多態(tài)和與VB2、葉酸和蛋氨酸攝入之間亦存在交互作用，ORint分別為1.35、1,41和1.47。在煙酸中等攝入組中，TS5'-UTR3Rg/3Rc+3Rg/2R+3Rc/2R+2R/2R+3Rc/3Rc組合基因型發(fā)生結直腸癌的風險是3Rg/3Rg的2.65倍。 結論： 本次以非配對人群為基礎的病例對照研究揭示： 1.結

16、直腸癌的危險因素有大學以上文化程度、家族腫瘤史和被動吸煙、MTHFR-677CT/1298AC組合型基因、MTRR-66G等位基因； 2.結直腸癌的保護因素有常吃蔬菜、水果，視黃醇、維生素C、總膳食纖維等營養(yǎng)素的攝入較高、TS5'-UTR2R/2R基因型。 3.MTHFRC677T和MTRR A66G基因多態(tài)，吸煙史與MTRR A66G，吸煙年限與MTRR A66G多態(tài)，吸煙程度與MTHFRC677T，吸煙程度與MTHF

17、RA1298C，吸煙程度與MTRA2756G，吸煙程度與MTRRA66G，吸煙程度與TS3’-UTRHE，吸煙程度與TS5’-UTR基因，飲酒史與MTRR A66G多態(tài)，飲酒年限與MTHFRC677T，飲酒年限與MTHFRA1298C，飲酒年限與MTRA2756G，飲酒年限與MTRRA66G，飲酒年限與TS5’-UTR多態(tài)，飲食VitB2攝入和MTRRA66G,飲食VitB2攝入和TS5’-UTR多態(tài)，飲食煙酸攝入和MTRRA66G，飲

18、食VitB6攝入和MTRR A66G，飲食VitB12攝入和MTHFRC677T、A1298C，飲食VitB12攝入和MTRR A66G,飲食VitB12攝入和TS3'-UTR多態(tài)，飲食葉酸攝入和MTHFRA1298C，飲食葉酸攝入和MTRR A66G，飲食葉酸攝入和TS5'-UTR多態(tài)、飲食蛋氨酸攝入和MTHFRC677T，飲食蛋氨酸攝入和MTRR A66G，飲食蛋氨酸攝入和TS5'-UTR多態(tài)之間存在交互作用，共同改變個體結直腸癌風