染色質組蛋白乙酰化對FIGF誘導的胰島素基因及其轉錄因子表達的影響.pdf

1、目的：探索C-Fos誘導生長因子(C-Fos-Induced Growth Factor，F(xiàn)IGF)對胰島素基因(Insulin)及其轉錄因子神經源素3（neurogenin3，Ngn3）、肌腱膜的纖維肉瘤腫瘤基因系物A(Fibrosar-coma oncogene family，protein A,MafA)的表達水平的影響，并進一步在表觀遺傳學上探索組蛋白乙?；谶@一胰島素基因表達體系中的調節(jié)作用。
　　方法：培養(yǎng)小鼠胎肝細胞

2、系（BNL），用帶FIGF基因的腺病毒載體轉染小鼠胎肝細胞，設置綠色熒光蛋白空載體腺病毒為對照組;Real time-PCR檢測FIGF基因相對表達量，胰島素基因及轉錄因子Ngn3、MafA基因的相對表達量；用帶FIGF基因的腺病毒載體轉染小鼠胎肝細胞，設置綠色熒光蛋白空載體腺病毒為對照組;提取核蛋白應用ELISA方法檢測組蛋白乙酰化酶（HAT）活性水平，組蛋白去乙?；福℉DAC）活性水平，提取全基因組組蛋白檢測組蛋白H3、組蛋白H4

3、乙酰化水平。
　　結果：RT-PCR結果顯示：實驗組較對照組和空白組FIGF基因相對表達量顯著增高差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），實驗組胰島素基因及轉錄因子Ngn3、MafA較對照組有不同程度的增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Western Blot結果顯示轉錄因子Ngn3、MafA蛋白表達，在檢測組蛋白乙酰化酶（HAT）活性，組蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性，組蛋白H3/H4乙?；胶蟀l(fā)現(xiàn)，實驗組HAT活性較對照

4、組和空白組明顯增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），實驗組HDAC活性較對照組和空白組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），組蛋白H3/H4乙酰化水平實驗組高于對照組和空白組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：FIGF基因在小鼠胎肝細胞中高表達，激活胰島素基因，胰島素轉錄因子Ngn3、MafA不同程度高表達，說明FIGF在胰島素基因表達過程中調控胰島素基因及其轉錄因子表達；HAT活性增高說明FIGF促進組