柴胡醋制前后的化學及藥理比較研究.pdf

1、選題依據(jù)：柴胡為常用中藥材，作為傳統(tǒng)中藥應用已有數(shù)千年歷史。中藥炮制是我國醫(yī)藥文化遺產(chǎn)中的主要組成部分，它在預防和控制疾病中扮演重要的角色，以確保其安全和有效的臨床應用。柴胡經(jīng)醋制后變?yōu)榇撞窈瑯訌V泛應用于臨床。柴胡經(jīng)醋制后其化學和藥理作用都發(fā)生了改變，醋制柴胡中柴胡皂苷b1和b2的含量增加，柴胡皂苷a、c和d的含量降低，且揮發(fā)油的含量和成分也發(fā)生了一定的改變。且醋制柴胡疏肝利膽、止痛作用增強、其毒性作用也有所降低。然而，醋制引起柴胡

2、化學成分的差異未有全面、系統(tǒng)的研究，其藥理作用的比較也僅從常規(guī)的生化指標及病理切片進行比較，其作用機制仍不明確。此外，《中國藥典》收載的炮制用醋為米醋，然而在中國市場醋的種類豐富，它們是否可作為炮制用醋，不同醋的種類引起柴胡炮制的差異尚未研究。
　　目的：明確柴胡醋制前后化學成分的差異。比較它們的保肝作用及其毒性的異同，尋找差異代謝物，在體內(nèi)代謝物水平上初步探討其藥效作用機制及毒性作用機制。此外比較醋的種類對醋制柴胡在化學和藥理作

3、用上的影響，為柴胡及醋制柴胡臨床應用安全性和有效性提供理論基礎。
　　方法：本研究用兩種醋（陳醋和米醋）進行柴胡的炮制，以1H-NMR代謝組學比較柴胡醋制前后的化學差異，GC-MS結合多元統(tǒng)計分析比較揮發(fā)油的變化，HPLC定量分析柴胡皂苷的轉(zhuǎn)化。此外，CCl4致小鼠肝損傷模型比較柴胡醋制前后的保肝作用，用大鼠急性毒性實驗比較它們的毒性作用，并用體液代謝組學評價去藥理及毒性機制。兩種不同的醋制柴胡的化學、藥理和毒性作用也進行了比較，

4、以評價炮制過程中醋的影響。
　　結果：1.在化學成分的研究中，陳醋和米醋的pH值存在差異，1H-NMR提供整體的化合物輪廓圖，也可直觀看出兩種醋的差異。
　　（1）1H-NMR代謝組學結合多元統(tǒng)計分析比較了柴胡醋制前后的化學成分的變化，在1H-NMR圖譜中共指認了36個代謝物，柴胡和醋制柴胡可以明顯的區(qū)分開，柴胡經(jīng)醋制后柴胡皂苷b1、柴胡皂苷b2、乙酸、蘋果酸等含量升高，柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、蔗糖等含量降低。兩種醋制柴胡也

5、可明顯分開，蔗糖、甘氨酸、琥珀酸等含量存在差異。
　　（2）GC-MS結合多元統(tǒng)計分析比較柴胡醋制前后揮發(fā)油的變化，結果表明醋制使柴胡揮發(fā)油的含量降低，化學成分也發(fā)生了變化，包括一些成分的出現(xiàn)（如2-壬基乙炔、α-畢澄茄烯、橙花叔醇）和另一些成分的消失（如β-蒎烯、正壬醛、馬鞭烯醇等），以及部分化合物含量的升高或降低（如十二醛、苯甲醛、愈創(chuàng)木酚）。兩種醋制柴胡的揮發(fā)油含量無顯著性差異，但一些成分（如戊醛、苯甲醛、硬脂酸等）的含量也

6、存在差異。
　　（3）HPLC定量分析了柴胡醋制前后的柴胡皂苷的含量變化，柴胡皂苷a和d含量降低，柴胡皂苷b1和b2的含量升高，與文獻報道一致。兩種醋制柴胡的柴胡皂苷的含量也存在著差異。
　　2.在藥理作用的比較中，比較了柴胡生品及兩種醋制品對CCl4引起小鼠肝損傷的保護作用，通過1H-NMR進行肝臟的代謝組學分析，共鑒定了9個相關的生物標志物，包括丙氨酸、苯丙氨酸和?；撬岬龋婕鞍被岽x、?；撬岽x等。柴胡生品及其兩個炮

7、制品均有一定的肝保護作用，表現(xiàn)為病理切片的改善，生化指標ALT和AST的回調(diào)，及部分差異代謝物回調(diào)。且醋制柴胡作用優(yōu)于生品柴胡，陳醋制柴胡的作用略優(yōu)于米醋制柴胡。
　　3.在柴胡醋制前后毒性比較研究中，柴胡生品和醋制柴胡均有一定的毒性作用，表現(xiàn)為生化指標ALT、AST和ALP的升高，及病理切片的改變。1H-NMR代謝組學進一步探討柴胡的毒性作用機制，找到一些差異代謝物，其中肝臟中甲硫氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸可以被認為是肝損傷的潛在生

8、物標志物，牛磺酸、鳥氨酸、肌醇可以作為腎功能異常的潛在生物標志物。這些差異代謝物可能參與氨基酸代謝、能量代謝、?；撬岽x和脂質(zhì)代謝等。柴胡生品及醋制柴胡對大鼠肝腎均有一定的毒性作用，且它們之間沒有顯著性差異，但綜合其生化指標及代謝組學分析，兩種醋制的毒性作用略小于柴胡生品，兩種醋制柴胡的毒性作用也有一定的不同，相對而言，陳醋制柴胡的毒性較小。
　　結論：1.柴胡生品和醋制品在化學成分、保肝作用及毒性作用均存在著差異。醋制后柴胡的化