職業(yè)性鉻暴露與外周血P16基因甲基化關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過調(diào)查不銹鋼冶煉工人的職業(yè)史、檢測(cè)作業(yè)環(huán)境鉻的外暴露濃度、作業(yè)工人血鉻內(nèi)暴露濃度、外周血P16基因甲基化狀態(tài)及氧化應(yīng)激指標(biāo)，探討職業(yè)性鉻暴露對(duì)作業(yè)工人外周血P16基因甲基化狀態(tài)及P16基因下游蛋白表達(dá)水平的影響，分析氧化應(yīng)激與P16基因甲基化間關(guān)系，為鉻的毒性機(jī)制研究提供依據(jù)；探討職業(yè)性鉻暴露工人外周血P16基因甲基化的影響因素，為職業(yè)防護(hù)和健康管理提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　本研究選擇某鋼鐵集

2、團(tuán)公司男性不銹鋼冶煉工人216人為鉻暴露組，其中爐前工67人、連鑄工97人以及澆鋼工52人，對(duì)應(yīng)工作環(huán)境分別為煉鋼車間、連鑄車間及澆鋼車間；選擇男性鍋爐運(yùn)行工121人為對(duì)照組，對(duì)應(yīng)工作環(huán)境為鍋爐運(yùn)行車間。研究對(duì)象近期3個(gè)月無抗腫瘤藥物服用史、電離輻射接觸史。參照《工作場(chǎng)所空氣中有害物質(zhì)監(jiān)測(cè)的采樣規(guī)范》（GBZ159-2004）及《工作場(chǎng)所空氣有毒物質(zhì)測(cè)定》（GBZ/T160-2004）對(duì)作業(yè)工人作業(yè)場(chǎng)所監(jiān)測(cè)采樣；采用統(tǒng)一設(shè)計(jì)的調(diào)查問卷對(duì)

3、研究對(duì)象進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查；抽取工人班后空腹3ml抗凝靜脈血與3ml非抗凝靜脈血。采用石墨爐原子吸收光譜法（Graphite furnace atomic absorption spectrophotometry）檢測(cè)研究對(duì)象作業(yè)環(huán)境中鉻及其化合物濃度及血清鉻含量；全血提取DNA，采用甲基化特異性PCR法(Methylation-Specific PCR,MSP)擴(kuò)增P16基因并測(cè)定其甲基化狀態(tài)；采用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-Link

4、ed Immuno Sorbent Assay,ELISA）檢測(cè)血清8-羥基脫氧鳥苷（8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（Glutathione,GSH）和P16蛋白的含量。對(duì)分類變量進(jìn)行?2檢驗(yàn)，對(duì)連續(xù)性變量采用t檢驗(yàn)及方差分析，分析工種、班次、工齡、吸煙及飲酒等對(duì)職業(yè)性鉻暴露工人的外周血P16基因甲基化的影響，采用非條件logistic回歸進(jìn)一步

5、分析外周血P16基因甲基化的影響因素。
　　結(jié)果:
　　1.研究對(duì)象鉻的內(nèi)外暴露檢測(cè)結(jié)果
　　暴露組煉鋼車間、連鑄車間、澆鋼車間與對(duì)照組鍋爐運(yùn)行車間鉻及其化合物暴露濃度作t檢驗(yàn)，結(jié)果暴露組各個(gè)車間鉻及其化合物濃度均高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。暴露組血鉻濃度高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。暴露組人群具體按工種分為煉鋼工組、連鑄工組及澆鋼工組，加之對(duì)照組鍋爐車間組；進(jìn)行組間的血清鉻含量

6、方差分析發(fā)現(xiàn)，四組間血鉻含量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。進(jìn)一步采用LSD-t檢驗(yàn)對(duì)四組人群做兩兩比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。
　　2.研究對(duì)象外周血P16基因甲基化率及P16蛋白表達(dá)含量的比較
　　經(jīng)?2檢驗(yàn)暴露組外周血P16基因甲基化率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）；經(jīng)wilcoxon秩和檢驗(yàn)暴露組血清P16蛋白表達(dá)含量低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.024）；t檢驗(yàn)

7、分析氧化應(yīng)激指標(biāo)顯示：暴露組血清8-OHdG含量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.012）；暴露組血清GSH含量低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.028）；暴露組與對(duì)照組間血清MDA含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Spearman秩相關(guān)分析結(jié)果外周血P16基因甲基化與血清8-OHdG、MDA和GSH含量間并無顯著相關(guān)性（P=0.492、0.710和0.085）。
　　3.職業(yè)性鉻暴露人群外周血P16基因甲基化影響因

8、素分析因素LSD-t檢驗(yàn)煉鋼工連鑄工和澆鋼工間外周血P16基因甲基化率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）；倒班組的外周血P16基因甲基化率明顯高于長白班組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。暴露人群按工齡分組，30~38年工齡段工人外周血P16基因甲基化率最高（80.5％），隨工齡的增加外周血P16基因甲基化率呈升高趨勢(shì)，各工齡段差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（趨勢(shì)?2=9.018，P=0.029）；暴露人群吸煙組與非吸煙組外周血P16基因甲

9、基化率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；暴露人群飲酒組與非飲酒組外周血P16基因甲基化率差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；非條件logistic回歸分析顯示：高血鉻濃度（OR=1.956，95%CI：1.285~2.977）與倒班（OR=2.408，1.795~5.828）為職業(yè)性鉻暴露工人外周血P16基因甲基化的危險(xiǎn)因素。
　　結(jié)論：
　　1.不銹鋼冶煉車間空氣鉻及其化合物濃度明顯高于鍋爐運(yùn)行車間，但未超過國家職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)