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文檔簡介
1、目的:通過有氧運動訓練膝骨關節(jié)炎(osteoarthritis, OA)模型大鼠,觀察膝OA關節(jié)軟骨及軟骨細胞變化情況,測定關節(jié)軟骨中沉默信息調節(jié)因子2同原蛋白6(silent information regulator2 homolog protein6, SIRT6)和基質金屬蛋白酶13(matrix meta-lloproteinase13, MMP-13)的表達情況,探討有氧運動對膝OA的療效和可能的機制,同時明確聯合的有氧運動
2、訓練其療效是否更佳。
方法:(1)對象:從西南醫(yī)科大學實驗動物中心購買清潔級雄性 SD大鼠50只,采用隨機數字表法均分為五組:正常對照組、模型組、跑臺組、游泳組、跑臺+游泳組。正常對照組單純籠內飼養(yǎng),自由飲水飲食,不做任何處理;其余四組均以木瓜蛋白酶誘導左膝OA模型,4周后跑臺組、游泳組、跑臺+游泳的聯合訓練組均予以有氧運動訓練干預。(2)干預措施:模型組籠內飼養(yǎng),自由飲水飲食,不做任何干預;跑臺組:跑步訓練,20m/min,
3、每次30分鐘,每天1次;游泳組:游泳訓練,每次40min,每天1次;跑臺+游泳組:跑步訓練結束休息1小時后進行游泳訓練。有氧運動訓練干預4周后處死全部大鼠,取左股骨內側髁關節(jié)軟骨制作標本,觀察軟骨及各指標的變化情況。(3)觀察指標:①大鼠左膝關節(jié)的形態(tài)變化;②軟骨細胞的變化情況;③軟骨中SIRT6和MMP-13的表達情況。
結果:(1)關節(jié)軟骨大體觀察:正常對照組:關節(jié)腔無積液,軟骨光滑、明亮,無裂紋;模型組:關節(jié)腔積液明顯,
4、軟骨偏黃,表面粗糙,裂紋、裂隙、糜爛形成,局部軟骨全層缺損,暴露軟骨下骨;跑臺組:關節(jié)腔積液較少,軟骨稍黃,部分表面不平整,散在分布點狀充血,偶有裂紋;游泳組:關節(jié)腔偶有積液,軟骨稍黃,少部分不平整,點狀充血少見,未見明顯裂紋及糜爛;跑臺+游泳組:關節(jié)腔積液少見,軟骨稍淡黃,表面基本平整,未見明顯充血、裂紋及糜爛。將結果按彭太平法組織病理學分級后秩和檢驗,與模型組相比,各有氧運動訓練組均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),且跑臺+游泳的聯合
5、訓練組改善最為明顯。(2)HE染色后光鏡觀察:正常對照組:軟骨表面平整、光滑,軟骨豐富,軟骨細胞大小一致,排列規(guī)則,潮線完整;模型組:軟骨表面不平,軟骨細胞大量減少,排列紊亂,著色淺,“空泡”細胞簇聚,潮線混亂;跑臺組:部分軟骨表面不平整,偶有裂紋,軟骨層變薄,軟骨細胞減少,染色變淺,排列欠規(guī)則,可見紊亂的潮線;游泳組:軟骨表面較平整,裂紋少見,軟骨層輕度變薄,軟骨細胞減少,排列相對整齊,潮線基本完整;跑臺+游泳組:軟骨表面基本平整、光
6、滑,軟骨層未見明顯變薄,軟骨細胞無明顯減少,大小較一致,排列較整齊,潮線基本完整。將光鏡結果按改良 Mankin’s評分,與模型組相比,各有氧運動訓練組均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),且跑臺+游泳的聯合訓練組改善最為明顯。(3)SIRT6和MMP-13的表達:正常對照組:SIRT6免疫組化后,大量軟骨細胞核呈濃棕色著色,數量多,而MMP-13免疫組化后,只有極少量細胞著色;模型組:與正常對照組相反, SIRT6組化后,少量軟骨細胞核淺
7、棕色著色,而MMP-13組化后,大部分細胞棕色濃染,著色均勻;跑臺組:軟骨細胞較模型組明顯增多,SIRT6組化后,被著色的細胞核也明顯增多,但較正常組仍偏少,呈棕色,MMP-13組化后,少部分細胞棕色染色,數量較正常對照組多;游泳組:軟骨細胞明顯增多,SIRT6與MMP-13表達情況與跑臺組相近。跑臺+游泳組:軟骨細胞數量進一步增多,較正常對照組稍少,SIRT6與MMP-13表達情況與正常對照組相近,但SIRT6表達稍少,而MMP-13
8、表達稍多。將各組所測得的 SIRT6和 MMP-13表達情況進行比較,與模型組相比,各有氧運動訓練組結果均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),跑臺+游泳的聯合訓練組與正常對照組最為接近,而跑臺組與游泳組差異不明顯。(4)SIRT6和 MMP-13表達相關性分析:各組分別進行 SIRT6和 MMP-13表達的直線相關性分析,結果各組均呈負相關(P<0.05)。
結論:(1)聯合有氧運動訓練對膝OA療效明顯優(yōu)于單一有氧運動訓練。(2)
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