健膝丸對大鼠膝骨關節(jié)炎組織形態(tài)學的影響.pdf

1、　　目的：觀察健膝丸對實驗大鼠膝骨關節(jié)炎組織形態(tài)學的影響,探討其治療骨關節(jié)炎的作用機理,為臨床運用以及進一步探索骨關節(jié)炎的發(fā)病機制提供依據(jù)。
　　方法：將40只大鼠隨機區(qū)組法分為正常組、模型組、實驗組(健膝丸組)、對照組(抗骨增生膠囊組),每組10只。正常組假手術處理,模型組、實驗組、對照組按照改良 Hulth 方法建立動物模型,切斷大鼠右下肢膝關節(jié)內(nèi)側副韌帶、摘除內(nèi)側半月板及切斷前后交叉韌帶,術后不固定傷肢,自由活動。1 周

2、后開始每天強迫大鼠活動 0.5小時,連續(xù) 8周,復制膝骨關節(jié)炎實驗動物模型。術后 1 周在造模的同時開始用藥,實驗組以健膝丸 1.35g/kg 灌胃,對照組以抗骨增生膠囊0.4725g/kg灌胃,正常對照組和模型對照組則給予等體積的0.9%生理鹽水,每日1 次,連續(xù) 8 周。治療 8周后,處死動物,解剖右膝關節(jié),取股骨內(nèi)髁關節(jié)軟骨及部分軟骨下骨標本,分別經(jīng) HE、Masson、Safranin-O 染色,光鏡觀察并行Mankin’s評分

3、。
　　結果：HE 染色顯示,正常組關節(jié)軟骨和軟骨下骨組織形態(tài)基本正常。模型組軟骨表面粗糙不整,表層軟骨纖維化變性,出現(xiàn)裂隙深達移行層,軟骨表面糜爛、完全剝落,形成缺損區(qū),軟骨下骨裸露,軟骨細胞數(shù)量增加明顯,有簇集現(xiàn)象,各層肥大軟骨細胞增多,出現(xiàn)大量空軟骨陷窩；軟骨細胞排列紊亂,四層結構分辨不清晰,可見多重潮線或潮線中斷；部分切片可見明顯的軟骨下骨硬化或囊性變形成,邊緣有丘狀隆起的骨贅,骨小梁增粗。實驗組關節(jié)軟骨破壞較模型組明

4、顯減輕,表面欠光滑,表層軟骨細胞丟失,可見軟骨層變薄,軟骨膜缺如,表層軟骨纖維化變性,出現(xiàn)淺表裂隙,深層可見肥大軟骨細胞,出現(xiàn)空軟骨陷窩；細胞排列尚整齊,四層結構尚清晰,潮線基本完整；無明顯的軟骨下骨硬化或囊性變。對照組大體同實驗組,但其比實驗組出現(xiàn)較多的空軟骨陷窩。
　　Masson三色染色顯示,正常組軟骨基質膠原染藍綠色,著色均勻,向潮線方向染色加深；軟骨下骨板及骨小梁深染綠色,骨膠原深染紅色,呈紅綠相間。模型組軟骨表層變

5、性,軟骨失染。實驗組軟骨表層及移行層染色淺淡,部分區(qū)域染色不均勻,潮線附近有火焰狀升起的紅染。對照組與實驗組相比,潮線附近有火焰狀升起的紅染,顏色較重。
　　Safranin-o-fast green-iron染色顯示,正常組軟骨蛋白多糖紅染均勻,無失染；模型組全層軟骨失染；實驗組染色變淡,染色不均勻；對照組染色較淡,有失染。
　　Mankin’s評分結果顯示,與正常組比較,模型組、實驗組、對照組積分顯著增加(P<0

6、.05)；與模型組比較,對照組、實驗組積分減少顯著(P<0.05)；實驗組與對照組軟骨組織損傷積分差異無統(tǒng)計學意義( P>0.05)。
　　結論：通過對實驗大鼠膝骨關節(jié)炎組織形態(tài)學觀察,實驗組、對照組均出現(xiàn)軟骨退變表現(xiàn),與正常組之間存在差別,但與模型組相比,軟骨退變程度較輕,Ⅱ型膠原和蛋白多糖丟失較少,軟骨下骨硬化不明顯。說明健膝丸可減少軟骨Ⅱ型膠原和蛋白多糖丟失,減輕關節(jié)軟骨破壞,減緩軟骨下骨硬化,延緩骨關節(jié)炎的發(fā)展進程,但