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文檔簡介
1、甲醛(Formaldehyde,F(xiàn)A)是一種普遍存在的環(huán)境污染物,也是我國主要的室內(nèi)空氣污染物之一。世界衛(wèi)生組織將甲醛歸為人類致癌物并認為甲醛導(dǎo)致白血病的證據(jù)強有力但不夠充分,因此甲醛與白血病相關(guān)性的研究成為一項研究熱點,也引起了全社會的廣泛關(guān)注。白血病是一類發(fā)生在造血系統(tǒng)的惡性腫瘤,造血系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄因子在血細胞的分化發(fā)育過程中起著重要的調(diào)控作用,除此之外,轉(zhuǎn)錄因子還參與到其下游的相關(guān)基因的表達調(diào)控過程中。骨髓組織是造血干細胞分化發(fā)育的場所
2、,同時也是白血病發(fā)生的靶器官。因此,本實驗通過研究甲醛暴露對造血系統(tǒng)相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子表達情況的影響以及骨髓組織的毒性效應(yīng),以探討甲醛對骨髓和造血功能的影響,為甲醛與白血病相關(guān)性的研究提供一定的生物學證據(jù)。
本研究以6周齡雄性Balb/C小鼠為研究對象,將其隨機分為3組進行口鼻式氣態(tài)甲醛暴露,染毒濃度根據(jù)國家標準分別為0.5mg/m3、3.0 mg/m3以及空白對照組0 mg/m3,染毒時間采用職業(yè)暴露模式即每天暴露8小時,5個工
3、作日和2個休息日交替進行,為期2周。染毒結(jié)束后,采用RT-PCR技術(shù)對轉(zhuǎn)錄因子C/EBPα、GATA-2、SCL、C-myb、GATA-1、NFE2、Ikzf5和PAX5的mRNA表達水平進行檢測;對小鼠尾部取血進行全血細胞計數(shù),分析各類型血細胞的數(shù)量變化;將小鼠骨髓組織制作切片進行病理學觀察;對小鼠骨髓組織中的氧化損傷指標:活性氧簇(ReactiveOxygen Species,ROS)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和代
4、謝酶細胞色素P4501A1(Cytochrome P450 proteins1A1,CYP1A1)、谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶T1(GlutathioneS-transferase theta1,GSTT1)的表達,炎癥指標:核轉(zhuǎn)錄因子κB(Nuclear TranscriptionFactor-κB,NF-κB)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素1β(Interleukin-1β,IL
5、-1β)含量以及凋亡因子:含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的活性進行檢測。結(jié)果顯示,甲醛暴露后,所測轉(zhuǎn)錄因子的表達出現(xiàn)了或升高或降低的顯著性變化;通過組織病理學觀察發(fā)現(xiàn)高濃度組骨髓組織出現(xiàn)明顯異常,巨核細胞增多并出現(xiàn)輕微的纖維化現(xiàn)象;主要血細胞的數(shù)量發(fā)生顯著改變;ROS累積,GSH耗損,且代謝酶CYP1A1和GSTT1的表達顯著改變
6、,呈相反趨勢,機體的氧化平衡受到破壞;氧化敏感性轉(zhuǎn)錄因子NF-κB表達上升,促炎癥因子TNF-α及IL-1β的含量顯著升高,表明骨髓組織中出現(xiàn)了一定的炎癥反應(yīng);凋亡因子Caspase-3的活性在高濃度組出現(xiàn)了顯著升高。
本研究發(fā)現(xiàn)甲醛暴露會影響有造血調(diào)控功能的轉(zhuǎn)錄因子的表達,進而可能對造血系統(tǒng)產(chǎn)生不利影響,為以后的深入研究提供了思路;同時,通過對骨髓組織各個方面指標的測定,發(fā)現(xiàn)甲醛暴露會使其產(chǎn)生一系列負面影響,增加了罹患造血系
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