甲醛暴露對(duì)小鼠腦和骨髓中NO-cGMP和cAMP信號(hào)通路的影響.pdf

1、甲醛(Formaldehyde，F(xiàn)A)是我國(guó)目前最重要的室內(nèi)空氣污染物，近年來(lái)，甲醛導(dǎo)致白血病發(fā)生成為社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)，雖然美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究所已經(jīng)確定甲醛暴露可以引發(fā)白血病，但是甲醛導(dǎo)致白血病的具體分子機(jī)制仍然未知。甲醛是內(nèi)源性物質(zhì)，能參與機(jī)體代謝反應(yīng)，研究發(fā)現(xiàn)，外源性甲醛暴露后并沒(méi)有引起生物體內(nèi)源性甲醛含量發(fā)生變化，但毒性依然存在。我們大膽推測(cè)，甲醛很有可能是以信號(hào)分子的形式通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)機(jī)體進(jìn)行調(diào)控，它也可以通過(guò)調(diào)控相應(yīng)的信號(hào)分子

2、通路進(jìn)而干擾機(jī)體正常的生理功能，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致機(jī)體病變。因此，本文以NO/cGMP和cAMP信號(hào)通路為切入點(diǎn)，探究吸入性甲醛能否以信號(hào)分子的形式對(duì)機(jī)體造血系統(tǒng)造成損傷。
　　本研究選用32只SPF級(jí)雄性BALB/c小鼠，將其隨機(jī)分為4組，每組8只，分別為:空白對(duì)照組、0.5 mg/m3甲醛染毒組、3.0 mg/m3甲醛染毒組和一氧化氮合酶拮抗劑(NG-monomethyl-L-arginine，L-NMMA)組。每天染毒前一小時(shí)，

3、需要對(duì)拮抗組小鼠腹腔注射L-NMMA（0.01 mL/kg，生理鹽水配制），染毒時(shí)采用仿真式全身暴露染毒方式，每天8小時(shí)連續(xù)染毒7天。染毒結(jié)束后，將小鼠麻醉處死，檢測(cè)小鼠骨髓、血漿、大腦皮層、海馬和腦干中NO/cGMP和cAMP信號(hào)通路中一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）、一氧化氮(nitric oxide，NO)、環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)和環(huán)磷

4、酸鳥(niǎo)苷(cyclic guaninemonophosphate，cGMP)含量變化，下游蛋白激酶A(protein kinase A，PKA)、蛋白激酶G(protein kinases G，PKG)以及cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP-responseelement binding protein，CREB)的表達(dá)情況，并將小鼠腦組織制作切片觀(guān)察其病理學(xué)變化。
　　結(jié)果顯示:氣態(tài)甲醛暴露對(duì)小鼠NO/cGMP和cAMP信號(hào)通路造

5、成了不同程度的影響。通過(guò)對(duì)NO/cGMP信號(hào)通路中的各分子水平的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，染毒組小鼠骨髓、血漿和不同腦區(qū)中的NOS、NO和cGMP含量均異常升高，cGMP下游的作用位點(diǎn)PKG的表達(dá)水平也出現(xiàn)明顯上升，但是L-NMMA拮抗組小鼠中各指標(biāo)與3.0 mg/m3染毒組相比均有不同程度的恢復(fù)。小鼠血漿、骨髓和不同腦區(qū)中的cAMP信號(hào)通路也受到影響，血漿和不同腦區(qū)中cAMP含量在0.5 mg/m3甲醛染毒濃度下顯著升高，在3.0 mg/m3甲醛染毒

6、濃度下顯著降低，cAMP下游的PKA表達(dá)水平異常升高，骨髓中的基因調(diào)控因子CREB表達(dá)上調(diào)，但注射有L-NMMA拮抗劑的小鼠與3.0mg/m3染毒相比所受影響較小。小鼠腦組織病理切片檢測(cè)結(jié)果顯示，3.0 mg/m3染毒組小鼠出現(xiàn)大量凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞，L-NMMA拮抗組小鼠的神經(jīng)細(xì)胞損傷程度與3.0 mg/m3染毒組相比較輕。
　　本研究發(fā)現(xiàn)氣態(tài)甲醛暴露能夠?qū)O/cGMP和cAMP信號(hào)通路的正常生理功能造成一定影響，對(duì)小鼠注射L-