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文檔簡介
1、【目的】:
肺癌是全身各種腫瘤中發(fā)病率與死亡率最高的惡性腫瘤,男性位居第一,女性僅次于乳腺癌位居第二,嚴(yán)重威脅人們的健康與生命。隨著腫瘤相關(guān)分子機制研究的深入以及分子靶向藥物的應(yīng)用,以基因為導(dǎo)向的個體化多學(xué)科綜合治療將扮演著越來越重要的角色。微小 RNA(miRNA)是一類長約22個核苷酸的保守非編碼小分子RNA,通過調(diào)控目標(biāo)基因表達,影響腫瘤細胞的增殖、分化及凋亡。本研究旨在分析miR-18a和miR-328在肺腺癌A549
2、細胞中的表達,探討下調(diào)miR-18a或miR-328的表達對其侵襲和遷移能力的影響。
【方法】:
(1)運用實時熒光定量PCR法檢測肺腺癌A549細胞和正常支氣管上皮BEAS-2B細胞中miR-18a和miR-328的相對表達量。
?。?)通過獲取人 miR-18a、miR-328序列,設(shè)計并合成其 inhibitor序列及NC序列,應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù),以下調(diào)miR-18a或miR-328的表達,從而建立低表
3、達miR-18a或miR-328的A549細胞模型。
?。?)進一步采用TranswellTM侵襲和遷移實驗分別檢測各組A549細胞侵襲和遷移能力的變化。
【結(jié)果】:
(1)與正常支氣管上皮BEAS-2B細胞相比,肺腺癌A549細胞中miR-18a和miR-328均呈高表達,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。
?。?)與空白對照組和陰性對照組相比,肺腺癌A549細胞中,轉(zhuǎn)染miR-18a inhib
4、itor組的miR-18a的表達明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05);轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的miR-328的表達同樣明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。
?。?)TranswellTM侵襲實驗檢測結(jié)果顯示,與空白對照組和陰性對照組相比,轉(zhuǎn)染miR-18a inhibitor組的A549細胞侵襲能力明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01);轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的A549
5、細胞侵襲能力明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。
?。?)與空白對照組和陰性對照組相比,轉(zhuǎn)染miR-18a inhibitor組的A549細胞與轉(zhuǎn)染miR-328 inhibitor組的A549細胞遷移能力均明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。
【結(jié)論】:
在A549細胞中miR-18a和miR-328均呈高表達,下調(diào)A549細胞miR-18a或miR-328的表達水平均可有效抑制腫瘤細胞
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