MiR-18a，miR-145和miR-495在小鼠胰腺發(fā)育過程中抑制Ptfla的表達(dá).pdf

1、胰腺是一個(gè)重要的內(nèi)外分泌混合腺，胰腺內(nèi)分泌部中的β細(xì)胞缺失或發(fā)生功能障礙就會導(dǎo)致糖尿病，而外分泌細(xì)胞異常增殖會導(dǎo)致胰腺癌癥的發(fā)生。因而研究胰腺器官發(fā)生發(fā)展的機(jī)制對于胰腺疾病的治療具有重要意義。Ptf1a(bHLH轉(zhuǎn)錄因子)是胰腺特化與外分泌分化所必需的轉(zhuǎn)錄因子。最近研究發(fā)現(xiàn)，Ptf1a調(diào)控胰腺細(xì)胞的分化存在劑量依賴性:低水平的Ptf1a促進(jìn)內(nèi)分泌分化，高水平Ptf1a抑制內(nèi)分泌分化促進(jìn)外分泌分化。然而，胰腺不同發(fā)育命運(yùn)細(xì)胞中Ptf1a的

2、表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制還不清楚。
　　MicroRNAs(miRNAs)是一類22nt左右的非編碼小RNA，它們在進(jìn)化過程中高度保守，通過切割靶mRNA或抑制靶mRNA的翻譯來調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。一些研究已經(jīng)表明，miRNAs在胰腺發(fā)育及功能調(diào)節(jié)中起重要作用，但目前還不知道哪些miRNAs在發(fā)育的胰腺上皮中調(diào)控Ptf1a的表達(dá)。
　　為了解決這一問題，我們首先結(jié)合兩個(gè)預(yù)測算法的結(jié)果，預(yù)測得到4個(gè)可能調(diào)控Ptf1a表達(dá)的miRNAs。隨后，

3、我們通過雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)證明其中3個(gè)miRNAs（miR-18，miR-145和miR-495）確實(shí)對Ptf1a的表達(dá)起到調(diào)控作用。通過qRT-PCR試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在小鼠胰腺發(fā)育過程中miR-18a和Ptf1a mRNA的表達(dá)模式成負(fù)相關(guān);而免疫熒光染色試驗(yàn)顯示miR-145/miR495與Ptf1a蛋白的表達(dá)模式成負(fù)相關(guān)。最后，為了進(jìn)一步了解小鼠胰腺發(fā)育過程中Ptf1a相關(guān)的分子機(jī)制，我們結(jié)合以往文獻(xiàn)數(shù)據(jù)與本文研究結(jié)果，繪制了小鼠胰腺發(fā)