姜黃素通過(guò)調(diào)控miR-21-PTEN通路抑制人肺腺癌A549細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　姜黃素，一種天然植物化學(xué)物質(zhì)，已被證實(shí)具有強(qiáng)效抗癌活性，本研究試圖確定姜黃素對(duì)于人類非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用的分子機(jī)制。
　　方法:
　　將不同濃度姜黃素處理人肺腺癌A549細(xì)胞48h，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及增殖情況，使用MTS法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖的影響。qRT-PCR法測(cè)定經(jīng)不同濃度的姜黃素處理48h后的A549細(xì)胞中microRNA-21的表達(dá)情況。使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將miR-21 mimic或PTEN的

2、小干擾RNA轉(zhuǎn)染到A549細(xì)胞，使miR-21過(guò)表達(dá)或PTEN基因沉默，再經(jīng)姜黃素處理48h后，使用Western Blot法檢測(cè)A549細(xì)胞中PTEN蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　相較于未經(jīng)姜黃素處理的A549細(xì)胞，濃度介于20-40μM之間的姜黃素可以呈濃度依賴性的抑制A549細(xì)胞增殖，其抑制效果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)，且以濃度為30μM抑制效果開(kāi)始明顯顯著(p<0.01)；經(jīng)姜黃素處理過(guò)的細(xì)胞對(duì)microR

3、NA-21的表達(dá)產(chǎn)生了一種呈濃度依賴性的抑制效果(p<0.05)。此外，PTEN已被證明為microRNA-21的一個(gè)靶點(diǎn),其蛋白水平由Western Blot法測(cè)定，轉(zhuǎn)染了miR-21 mimic或PTEN小干擾RNA的A549細(xì)胞，對(duì)比于陰性對(duì)照組，其PTEN蛋白水平下降明顯，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。而與相應(yīng)未經(jīng)姜黃素處理組比較，PTEN蛋白水平在經(jīng)姜黃素處理過(guò)的A549細(xì)胞中明顯升高(p<0.05)。
　　結(jié)論