荷葉生物堿通過p38MAPK信號通路下調(diào)人主動脈內(nèi)皮細胞表達Fractalkine.pdf

1、目的：
　　探討荷葉生物堿對氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）誘導(dǎo)的人主動脈內(nèi)皮細胞（HAECs）表達Fractalkine（FKN）及其信號通路的影響。
　　方法：
　　（1）、HAECs分別與含有0 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L Ox-LDL的DMEM完全培養(yǎng)基共同孵育24h，RT-qPCR法檢測各組細胞FKN mRNA的表達，Western-Blot法檢測各組細胞p38MAPK、p-p

2、38MAPK蛋白的表達，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）法檢測各組細胞上清液中FKN蛋白的表達；
　?。?）、預(yù)先用含有0mg/L，20mg/L，40mg/L，80mg/L荷葉生物堿的DMEM完全培養(yǎng)基干預(yù)HAECs24h，去上清，再用含有100mg/L Ox-LDL的DMEM完全培養(yǎng)基刺激HAECs24h，空白對照組除不含荷葉生物堿及Ox-LDL外其余條件同其他組，RT-qPCR法檢測各組細胞FKN mRNA的表達，Western-

3、Blot法檢測各組細胞p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表達，ELISA法檢測各組細胞上清液中FKN蛋白的表達。
　　結(jié)果：
　?。?）、與對照組（0mg/L Ox-LDL組）比較，不同濃度的Ox-LDL刺激HAECs后，HAECs的FKN mRNA及細胞上清中FKN的蛋白表達均呈濃度依賴性上升（p<0.01），p38MAPK、p-p38MAPK的蛋白表達及p38MAPK的磷酸化水平均呈濃度依賴性上升（p<0.01），

4、且各Ox-LDL組間差異性顯著（p<0.01）；
　?。?）、與對照組（0mg/L荷葉生物堿+100mg/L Ox-LDL+HAECs）組比較，不同濃度荷葉生物堿干預(yù)后，HAECs的FKN mRNA及細胞上清中FKN的蛋白表達均呈濃度依賴性下降（p<0.01），p38MAPK、p-p38MAPK的蛋白表達及p38MAPK的磷酸化水平均呈濃度依賴性下降（p<0.01），各荷葉生物堿組間差異性顯著（p<0.01）。
　　結(jié)論：<