聯(lián)合應(yīng)用bFGF、PDGF對大鼠脛骨骨折愈合的影響.pdf

1、目的：
　　研究局部聯(lián)合應(yīng)用外源性堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、血小板衍生生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）對大鼠脛骨骨折愈合過程的影響作用，為臨床早期治療骨折延遲愈合或不愈合提供實驗參考。
　　方法：
　　清潔級成熟雄性SD大鼠48只，隨機分成4組：A組（bFGF）、B組（PDGF）、C組（bFGF+P

2、DGF）、D組（空白對照組）。每組各12只。各組實驗動物按無菌操作要求建立左脛骨中段骨折模型并應(yīng)用1mm克氏針行髓內(nèi)內(nèi)固定治療。A組、B組及C組大鼠均于術(shù)后第3天，在骨折斷端周圍經(jīng)皮注射藥物，1次/d，連續(xù)7天，各組給藥方式如下：A組（100ng bFGF+0.3ml生理鹽水）；B組（100ng PDGF+0.3ml生理鹽水）；C組（100ng bFGF+100ng PDGF+0.3ml生理鹽水）。D組則于骨折斷端周圍經(jīng)皮注射等量生理鹽

3、水，給藥時間及次數(shù)均同于其他組。各組分別于術(shù)后2周及4周隨機抽選6只大鼠行股動脈取血并處死，X線照片觀察骨折愈合情況，取骨折局部大體標(biāo)本部分骨痂進行研磨、離心處理，留取上清液，并采用ELISA法測定骨痂標(biāo)本中ALP的含量。另取部分骨痂脫鈣后進行HE染色組織學(xué)觀察，并測定骨痂中骨小梁成骨指數(shù)IOB及平均骨小梁寬度。采用蛋白質(zhì)芯片技術(shù)測定2周及4周時大鼠血清中VEGF、BMP-2及IGF-1的含量。
　　結(jié)果：
　　1術(shù)后2周及

4、4周，大體標(biāo)本表明：A組、B組及C組在新生質(zhì)硬組織大小、硬度方面及骨痂成熟程度、穩(wěn)定性方面大于D組，C組則明顯優(yōu)于其他各組。
　　2術(shù)后2周X線示： C組大鼠骨折處局部骨折線模糊，骨折間隙較其他組小，斷端可見片狀模糊高密度影；A組和B組大鼠骨折處局部骨折線可見，較D組稍模糊，其斷端可見條索狀低密度影。術(shù)后4周X線示：C組大鼠骨折線消失，可見梭行外生骨痂影，形成骨橋并橋接骨折兩端；A組和B組大鼠骨折線基本消失，骨折斷端變鈍，

5、　　可見高密度外骨痂形成并連接骨折兩端；D組大鼠骨折線仍清楚可見，骨折斷端間隙較2周時縮小。
　　3組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)：術(shù)后2周時，C組切片有軟骨骨痂和纖維骨痂形成，其中軟骨痂較明顯，軟骨細(xì)胞增生活躍，新生骨小梁及血管較其他組明顯；A組和B組也見纖維骨痂和軟骨骨痂形成，其纖維骨痂相對明顯；D組則以纖維骨痂為主。術(shù)后4周時，C組大鼠骨小梁基本成熟，可見較多成熟板層骨，髓腔內(nèi)出現(xiàn)大量骨髓細(xì)胞；A組和B組大鼠可見明顯的條索狀軟骨鈣化，骨小梁

6、增多，可見部分成熟板層骨形成，髓腔內(nèi)可見部分骨髓細(xì)胞；D組纖維骨痂較2周時減少，軟骨骨痂增多，成骨細(xì)胞增生活躍。骨痂分析：術(shù)后2周及4周時，C組骨痂內(nèi)骨小梁成骨指數(shù)明顯高于其他各組且有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），A組及B組高于對照組D組，但小于C組，差異顯著存在且有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4 ELISA法測定骨痂中ALP的含量示： C組大鼠患肢骨痂內(nèi)ALP的含量于術(shù)后2周及4周時在各組中均為最高，且比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義

7、（P＜0.05）；術(shù)后2周時A組及B組高于D組并小于C組，且差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。術(shù)后4周時A組、B組及D組各組間無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　5血清生化指標(biāo)結(jié)果示：術(shù)后2周時，A、B、C三組大鼠血清中VEGF的含量均高于對照組D組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；C組最高，其次為B＞A＞D組。術(shù)后4周時：C組血清中VEGF的含量仍為四組中最高（P＜0.05），余三組間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。術(shù)

8、后2周時C組大鼠血清BMP-2的含量高于其他組（P＜0.05），B組大鼠血清BMP-2的含量高于A組和D組（P＜0.05）。術(shù)后4周時各組間無統(tǒng)計學(xué)差異。術(shù)后2周時，大鼠血清中IGF-1的含量為C組＞B組＞A組＞D組，（P＜0.05）。術(shù)后4周時A、B及D組小于C組（P＜0.05），但A、B、D三組間無明顯統(tǒng)計差異。
　　結(jié)論：
　　1局部單獨注射外源性堿性成纖維細(xì)胞生長因子或血小板衍生生長因子可以促進大鼠脛骨骨折愈合，且聯(lián)