條件性RNAi技術(shù)降低FGFR2的表達(dá)對(duì)小鼠脛骨骨折愈合的影響.pdf

1、目的：成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子及其受體(FGFs/FGFRs)存在與頭顱、多種含上皮細(xì)胞器官、組織(肺、腎、皮膚)及骨骼等組織。其中FGFs/FGFRs在骨骼發(fā)育和骨折愈合中起了重要的作用，許多發(fā)育性疾病和骨折的延遲愈合或者不愈合都與FGFs/FGFRs有重要的關(guān)系。利用轉(zhuǎn)基因小鼠建造FGFR2僅在成骨細(xì)胞的表達(dá)中降低的骨折模型，用一種新的方法來(lái)探討FGFR2在骨折愈合中的作用和機(jī)制，以便更好的了解骨折愈合中存在的問(wèn)題，向臨床治療骨折提供更好

2、的理論基礎(chǔ)和思路。 方法：把成骨細(xì)胞特異表達(dá)Cre重組蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠OC-Cre和條件性FGFR2敲低小鼠FGFR2-RNAi交配，得到雙轉(zhuǎn)基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre，這種小鼠就只在成骨細(xì)胞中FGFR2表達(dá)降低，然后制造骨折模型，觀察骨折愈合情況。1．通過(guò)整體動(dòng)物形態(tài)觀察；2 X片觀察3組織切片觀察。 結(jié)果：1．雙基因小鼠FGFR2KNAi；OC-Cre比同組對(duì)照小鼠在整體形態(tài)上表現(xiàn)為矮小，P<0.001

3、。2． X片對(duì)比觀察，野生型小鼠在21天時(shí)骨折全部愈合，雙基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre在21天時(shí)都沒(méi)有愈合。在28天時(shí)才出現(xiàn)骨折愈合。雙基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre比同組對(duì)照野生型小鼠骨折愈合明顯減慢。 3．通過(guò)對(duì)組織切片觀察，發(fā)現(xiàn)雙轉(zhuǎn)基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre比同組對(duì)照小鼠骨痂生長(zhǎng)量少；通過(guò)特殊染色方法計(jì)算骨折不同時(shí)期的軟骨面積，發(fā)現(xiàn)雙轉(zhuǎn)基因小鼠FGFR2RNAi；OC-Cre比同組對(duì)照小鼠軟骨面