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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:燒傷后容易發(fā)生以“高糖血癥”為表現(xiàn)的糖代謝障礙,容易引起不良預(yù)后。研究表明,燒傷后糖代謝障礙與胰腺損傷密切相關(guān)。Exendin-4是一種GLP-1受體激動(dòng)劑,并具有高糖依賴的胰島素促泌作用,且不會(huì)導(dǎo)致低血糖。近年來(lái)研究報(bào)道Exendin-4能抑制氧化應(yīng)激、炎癥和凋亡,而目前Exendin-4保護(hù)嚴(yán)重?zé)齻笠认贀p傷的機(jī)制尚缺乏研究。因此,本研究擬探討Exendin-4對(duì)嚴(yán)重燙傷大鼠早期胰腺損傷的影響與機(jī)制。
方法:成年健康
2、Wistar大鼠96只,隨機(jī)分為假燙組、假燙給藥組、燙傷組和燙傷給藥組,每組24只。燙傷組和燙傷給藥組大鼠背部浸于94℃熱水12秒,腹部6秒,制備50%TBSAⅢ°燙傷模型,假燙組和假燙給藥組使用37℃溫水,其余處理相同。燙傷給藥組和假燙給藥組傷后立即于皮下注射Exendin-4(4ug/kg),并于傷后每天8:00和20:00分別給藥一次,其它組大鼠同時(shí)以相同方式給予相同劑量的滅菌注射用水。傷后1d、3d和5d,剪尾法采血檢測(cè)各組大鼠
3、空腹血糖濃度;放射免疫法檢測(cè)血清胰島素濃度;干濕質(zhì)量法計(jì)算胰腺組織含水量;HE染色觀察胰腺形態(tài)變化;硫代巴比妥酸法檢測(cè)胰腺組織丙二醛(MDA)含量;免疫組織化學(xué)法分析胰腺誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)水平;免疫印跡法分析胰腺組織3-硝基硝基絡(luò)氨酸(3-NT)、B細(xì)胞淋巴瘤-2相關(guān)X蛋白(Bax)蛋白、活化部分半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)表達(dá)水平。
結(jié)果:假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)空
4、腹血糖濃度均無(wú)明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后1d、3d和5d空腹血糖濃度顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后1d和3d空腹血糖濃度顯著低于燙傷組;燙傷給藥組大鼠傷后1d空腹血糖濃度顯著高于假燙組和假燙給藥組。假燙組和假燙給藥組大鼠各時(shí)相點(diǎn)空腹血清胰島素濃度均無(wú)明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)空腹血清胰島素濃度均顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)空腹血清胰島素濃度均顯著高于燙傷組。假燙組和假燙給藥組大鼠
5、傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織含水量均無(wú)明顯升高或降低;燙傷組和燙傷給藥組大鼠傷后1d胰腺組織含水量顯著高于假燙組和假燙給藥組;與燙傷組比較,燙傷給藥組大鼠胰腺組織含水量無(wú)明顯升高或降低。HE染色結(jié)果顯示,假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰島形態(tài)規(guī)則,β細(xì)胞數(shù)量豐富,分布均勻,排列緊密,胞漿濃染,偶見(jiàn)空泡樣改變;燙傷組大鼠傷后1d即出現(xiàn)胰島空泡樣變和β細(xì)胞數(shù)量減少,傷后3d胰島內(nèi)出現(xiàn)廣泛空泡樣變,β細(xì)胞數(shù)量顯著減少,傷后5d胰島空泡樣變輕于傷后
6、3d,β細(xì)胞數(shù)量多于傷后3d;燙傷給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰島空泡樣變均輕于燙傷組,β細(xì)胞數(shù)量均多于燙傷組。假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織丙二醛(MDA)含量均無(wú)明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織丙二醛(MDA)含量均顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后1d和3d胰腺組織丙二醛(MDA)含量均顯著高于假燙組和假燙給藥組;與燙傷組比較,燙傷給藥組大鼠傷后5d胰腺組織丙二醛(MDA)含量低于燙傷組。免疫組化結(jié)
7、果顯示,假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰島誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)水平均無(wú)明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰島誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)水平均高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰島誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)水平均低于燙傷組,高于假燙組和假燙給藥組。Western Blot結(jié)果顯示,假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織3-硝基酪氨酸(3-NT)蛋白水平表達(dá)水平均無(wú)明顯升高或降低;傷
8、后3d和5d,燙傷組大鼠胰腺組織3-NT蛋白表達(dá)水平顯著高于假燙組和假燙給藥組;傷后3d和5d,燙傷給藥組大鼠胰腺組織3-NT蛋白表達(dá)水平顯著低于燙傷組,顯著高于假燙組和假燙給藥組。Western Blot結(jié)果顯示,假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織Bcl-2相關(guān)X(Bax)蛋白表達(dá)水平均無(wú)明顯升高或降低;傷后3d和5d,燙傷組大鼠胰腺組織Bax蛋白表達(dá)水平顯著高于假燙組和假燙給藥組;傷后3d和5d,燙傷給藥組大鼠胰腺組織Bax
9、蛋白表達(dá)水平低于燙傷組,顯著高于假燙組和假燙給藥組。Western Blot結(jié)果顯示,假燙組和假燙給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織Cleaved caspase-3蛋白表達(dá)水平比值均無(wú)明顯升高或降低;燙傷組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織Cleaved caspase-3蛋白表達(dá)水平顯著高于假燙組和假燙給藥組;燙傷給藥組大鼠傷后各時(shí)相點(diǎn)胰腺組織Cleaved caspase-3蛋白表達(dá)水平低于燙傷組,高于假燙組和假燙給藥組。
結(jié)論:皮下
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