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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討高原地區(qū)不同海拔高度嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇后大鼠肝臟損傷機(jī)制。
方法:取健康雄性Wistar大鼠240只,隨機(jī)分為低海拔組(1517m)和高海拔組(3848m),每個(gè)海拔高度隨機(jī)分為延遲復(fù)蘇組(DFR,n=50)、即時(shí)復(fù)蘇組(IFR,n=60)和假傷組(SG, n=10),于背部建立總體表面積為30%的燙傷模型,分別于傷后1h、6h、12h、24h、72h和168h各取10只大鼠剖腹取材。采用組織病理學(xué)、手工組織芯片技
2、術(shù)、TUNEL法、免疫組化與圖象分析技術(shù),檢測(cè)肝組織細(xì)胞凋亡、HIF-1α、P53、Bcl-2和HSP70在肝組織中的表達(dá)及其與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。
結(jié)果:
1.隨海拔高度的增加,肝細(xì)胞渾濁腫脹、胞質(zhì)疏松化明顯,匯管區(qū)及肝竇內(nèi)炎細(xì)胞浸潤明顯,肝細(xì)胞壞死及嗜酸性小體逐漸增多。
2.HIF-1α陽性表達(dá)多位于肝細(xì)胞核中,兩個(gè)海拔高度HIF-1α的表達(dá)強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)組均高于假傷組,隨海拔梯度上升,HIF-1α蛋
3、白表達(dá)增強(qiáng),各海拔高度DFR組表達(dá)高于同海拔IFR組,在傷后6、12、24、72h時(shí)相點(diǎn),海拔3848m各實(shí)驗(yàn)組分別高于海拔1517m各實(shí)驗(yàn)組。
3.P53的陽性表達(dá)多位于肝細(xì)胞核中,胞漿也有少量表達(dá),其表達(dá)其趨勢(shì)與HIF-1α蛋白表達(dá)趨勢(shì)基本一致,定量分析顯示亦與HIF-1α一致。
4.各海拔高度假傷組即有Bcl-2的表達(dá),同一海拔高度DFR組在傷后6h時(shí)相點(diǎn)表達(dá)強(qiáng)度高于相對(duì)應(yīng)的IFR組,高海拔DFR組與I
4、FR組在傷后6、72h時(shí)相點(diǎn)表達(dá)強(qiáng)于相應(yīng)的低海拔組。各試驗(yàn)組于傷后6h Bcl-2表達(dá)最高,12h表達(dá)明顯下降,24h下降至最低水平。
5.HSP70主要表達(dá)于肝細(xì)胞漿中,兩個(gè)海拔高度其表達(dá)強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)組均高于假傷組,隨海拔梯度上升,HSP70蛋白的表達(dá)增強(qiáng),各海拔高度DFR組高于IFR組。
6.肝細(xì)胞TUNEL陽性表達(dá)呈深棕色,染色質(zhì)濃縮,表達(dá)于肝細(xì)胞核內(nèi),各海拔高度其表達(dá)強(qiáng)度DFR組和IFR組均高于SG組,隨
5、海拔高度上升TUNEL表達(dá)增強(qiáng),各海拔高度DFR組表達(dá)強(qiáng)度高于同海拔IFR組,在傷后6、12、24、72h時(shí)相點(diǎn),高海拔組細(xì)胞凋亡率均強(qiáng)于相應(yīng)的低海拔組。
結(jié)論:
1.隨海拔高度的增加,嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇大鼠肝組織病理損害明顯加重;
2.高原地區(qū)嚴(yán)重燙傷延遲復(fù)蘇后肝細(xì)胞損傷與細(xì)胞凋亡有關(guān),且肝細(xì)胞凋亡數(shù)量隨海拔梯度升高而增加;
3.HIF-1α、P53可能參與了高原地區(qū)大鼠嚴(yán)重燙傷延
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