阿托伐他汀對(duì)2型糖尿病大鼠心肌RhoA-ROCK信號(hào)通路和纖維化的影響.pdf

1、目的：糖尿病心血管疾病是2型糖尿病患者主要死因之一，臨床上主要表現(xiàn)為心室舒張和收縮功能受損，以至出現(xiàn)頑固性心力衰竭，目前沒(méi)有特效的治療藥物。心肌纖維化是糖尿病心肌病的主要病理表現(xiàn)之一。本研究探討阿托伐他汀對(duì)2型糖尿病心肌纖維化和RhoA/ROCK通路的影響，為糖尿病心肌病的治療提供理論依據(jù)。
　　方法：選取雌性SD大鼠，給予高脂飲食聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型，并同時(shí)設(shè)立對(duì)照（NC）組。10w

2、末，測(cè)定空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、膽固醇（TC）、甘油三脂（TG），依據(jù)FBG及FINS計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）。將糖尿病大鼠隨機(jī)分組為糖尿病（DM）組、阿托伐他汀干預(yù)（DA，10mg/kg/d， i.p）組。每周監(jiān)測(cè)血糖、體重（BW）。21w末，大鼠行心臟彩超，測(cè)定收縮末左心室后壁厚度（LVPWs），舒張末左心室后壁厚度（LVPWd），左心室收縮末期內(nèi)徑（LVIDs），左室舒張末期內(nèi)徑（LVIDd）及左心

3、室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）。測(cè)定空腹靜脈FBG、FINS、TC、TG和糖化血紅蛋白（HbA1c）；HE染色觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化；Masson染色觀察心肌膠原沉積程度；檢測(cè)羥脯氨酸含量計(jì)算心肌膠原的含量；應(yīng)用 real-time PCR測(cè)定心肌Ⅰ型前膠原、Ⅲ型前膠原 mRNA的表達(dá)；應(yīng)用 Western blotting方法檢測(cè)心肌中活性 RhoA蛋白及磷酸化肌球蛋白磷酸酯酶靶點(diǎn)亞單位1（p-MYPT1）蛋白水平。
　　結(jié)果：

4、　　1.BW的變化：第10w末，高脂飲食大鼠的BW明顯高于對(duì)照組大鼠（P<0.05）。第21w末，糖尿病組大鼠的BW明顯低于對(duì)照組（P<0.01）；阿托伐他汀干預(yù)組BW與糖尿病組無(wú)明顯差異（P>0.05），但明顯低于對(duì)照組（P<0.01）。
　　2.心功能測(cè)定：糖尿病組大鼠與對(duì)照組大鼠相比，LVPWs、LVPWd、LVIDs及LVIDd均顯著增大（P<0.01），LVEF明顯降低（P<0.01）；阿托伐他汀干預(yù)組大鼠的LVPWs、

5、LVPWd、LVIDs及LVIDd較糖尿病組大鼠明顯降低（P<0.01），LVEF明顯增高(P<0.01)，較對(duì)照組相比，LVPWs、LVPWd、LVIDs及LVIDd有所升高（P<0.01），LVEF有所降低（P<0.01）。
　　3.血生化指標(biāo)：第10w末時(shí)，糖尿病大鼠的FINS、FBG、TG、TC及HOMA-IR均顯著高于對(duì)照組大鼠（P<0.01）。第21w末時(shí)，糖尿病組大鼠 FINS、FBG、HbA1c、TG、TC均顯著高

6、于對(duì)照組（P<0.01)；阿托伐他汀干預(yù)組大鼠和對(duì)照組相比，F(xiàn)INS、FBG、HbA1c、TG、TC均顯著升高(P<0.01,P<0.05)，但與糖尿病組大鼠相比較無(wú)差異性（P>0.05）。
　　4.HE染色結(jié)果：第21w末，對(duì)照組大鼠心肌細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)清晰。心肌細(xì)胞核呈橢圓形，間質(zhì)可見少量成纖維細(xì)胞。糖尿病組大鼠心肌細(xì)胞排列紊亂，結(jié)構(gòu)不清楚，胞漿疏松甚至斷裂，細(xì)胞核固縮，間質(zhì)中成纖維細(xì)胞明顯增多，炎性細(xì)胞積聚明顯。阿托伐他汀

7、干預(yù)組大鼠心肌細(xì)胞排列較糖尿病組大鼠整齊，成纖維細(xì)胞較糖尿病組大鼠顯著減少。
　　5.Masson染色結(jié)果：糖尿病組大鼠心肌間質(zhì)及血管周圍膠原纖維面積較對(duì)照組大鼠顯著增多（P<0.01）。阿托伐他汀干預(yù)組大鼠心肌間質(zhì)及血管周圍膠原面積較糖尿病組大鼠顯著減少（P<0.01），與對(duì)照組大鼠相比無(wú)差異性（P>0.05）。
　　6.心?、裥颓澳z原、Ⅲ型前膠原 mRNA表達(dá)及羥脯氨酸測(cè)定結(jié)果：糖尿病組大鼠心肌Ⅰ型、Ⅲ型前膠原mRNA表

8、達(dá)及羥脯氨酸含量顯著高于對(duì)照組大鼠(P<0.01)；阿托伐他汀干預(yù)組大鼠心?、裥汀ⅱ笮颓澳z原mRNA表達(dá)及羥脯氨酸含量顯著低于糖尿病組大鼠(P<0.01)，與對(duì)照組大鼠無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　7活性 RhoA及磷酸化 MYPT1水平：檢測(cè) MYPT1的磷酸化（p-MYPT1）水平反應(yīng) ROCK水平。糖尿病組大鼠心肌組織活性 RhoA蛋白及p-MYPT1水平較對(duì)照組顯著升高（P<0.05）；阿托伐他汀干預(yù)組大鼠心肌中活性R