哈薩克藥阿爾泰瑞香不同提取物對人食管癌Eca-109細(xì)胞的體外抑制作用.pdf

1、目的：采用現(xiàn)代細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，初探阿爾泰瑞香提取物抗食管癌Eca-109細(xì)胞作用機(jī)制，為哈薩克藥阿爾泰瑞香的后期研究提供依據(jù)。
　　方法：將阿爾泰瑞香三種提取物不同濃度，依次作用于人食管癌Eca-109細(xì)胞，采用四甲基偶氮唑鹽法（MTT法）測定Eca-109細(xì)胞的增殖抑制率；通過計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率，分析阿爾泰瑞香提取物對人食管癌細(xì)胞系Eca-109細(xì)胞增殖活性的影響。應(yīng)用倒置熒光顯微鏡技術(shù)，觀察細(xì)胞生長狀況及形態(tài)學(xué)變化。運(yùn)

2、用流式細(xì)胞術(shù)，檢測細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡率，探討阿爾泰瑞香對人食管癌Eca-109細(xì)胞的增殖抑制的作用及機(jī)制。采用蛋白免疫印跡技術(shù)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對細(xì)胞內(nèi)的PPARγ基因的表達(dá)水平進(jìn)行分析，探討阿爾泰瑞香不同提取物抗人食管癌Eca-109細(xì)胞的作用機(jī)制及與基因表達(dá)調(diào)控的關(guān)系。
　　結(jié)果：阿爾泰瑞香三種提取物對人食管癌Eca-109細(xì)胞具有明顯的抑制細(xì)胞生長的作用，與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。人食管癌Eca-

3、109細(xì)胞經(jīng)阿爾泰瑞香三種提取物處理后細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化。用阿爾泰瑞香三種提取物不同濃度處理人食管癌Eca-109細(xì)胞后處于S期的細(xì)胞數(shù)顯著升高，跟空白對照組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；G0/G1期的細(xì)胞數(shù)明顯下降，與空白對照組比較，差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。人食管癌Eca-109細(xì)胞經(jīng)阿爾泰瑞香三種提取物不同濃度處理后，檢測細(xì)胞凋亡率，結(jié)果與空白對照組比較藥物干預(yù)后癌細(xì)胞凋亡率明顯增大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0

4、.05）。人食管癌Eca-109細(xì)胞經(jīng)阿爾泰瑞香提取物不同濃度處理不同時(shí)間（24 h,48 h,72 h）后采用熒光定量PCR法檢測細(xì)胞內(nèi)PPARγmRNA表達(dá)量,結(jié)果經(jīng)三種提取物處理癌細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)PPARγmRNA表達(dá)量均顯著增加（P﹤0.05）。阿爾泰瑞香乙酸乙酯提取物干預(yù)24 h,48 h,72 h后細(xì)胞內(nèi)PPARγmRNA表達(dá)量增高（P﹤0.05）。阿爾泰瑞香正己烷、甲醇提取物干預(yù)48 h、72 h細(xì)胞內(nèi)PPARγmRNA表達(dá)量