姜黃素對(duì)糖尿病大鼠肝臟糖異生及Egr-1-C-EBPα途徑的影響.pdf

1、目的：觀察姜黃素對(duì)糖尿病大鼠肝臟糖異生的作用以及探索Egr-1/C/EBPα途徑與糖異生的關(guān)系。
　　方法：
　　1動(dòng)物分組及糖尿病模型的制備：健康雌性SD大鼠50只，體重180±20g，正常對(duì)照組10只，給予普通飼料喂養(yǎng)，其余40只為模型組，給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)6周后模型組給予1％鏈脲佐菌素（STZ）以30mg/kg腹腔注射制備糖尿病模型，正常對(duì)照組則予以等劑量的生理鹽水腹腔注射，注射STZ1周后監(jiān)測(cè)血糖，以隨機(jī)血糖

2、≥16.7mmol/L為糖尿病模型制備成功，連續(xù)監(jiān)測(cè)4周共成模27只。將成模大鼠分成4組，糖尿病組6只、低劑量姜黃素化合物組7只、中劑量姜黃素化合物組7只、高劑量姜黃素化合物組7只。
　　2藥物干預(yù)：低劑量姜黃素化合物組、中劑量姜黃素化合物組、高劑量姜黃素化合物組分別給予125mg/kg/d、250mg/kg/d、500mg/kg/d姜黃素化合物溶液灌胃治療（姜黃素化合物用玉米油溶解），糖尿病組和正常組則給予等劑量的溶劑玉米油灌胃

3、。
　　3標(biāo)本采集及檢測(cè)指標(biāo)：連續(xù)灌胃10周后禁食10小時(shí)下腔靜脈取血，離心后提取血清用于測(cè)定血清空腹血糖（FBG）及血清胰島素。然后宰殺動(dòng)物，取大鼠肝臟組織立即液氮速凍，置于-80℃冰箱保存用于Egr-1、G-6-P、PEPCK及肝糖原的檢測(cè)。其中采用實(shí)時(shí)定量PCR方法測(cè)檢Egr-1、G-6-P、PEPCK mRNA表達(dá)水平，western blot方法檢測(cè)Egr-1、G-6-P、PEPCK的蛋白表達(dá)水平，chip方法檢測(cè)Egr

4、-1與C/EBPα結(jié)合體的DNA表達(dá)水平，肝糖原采用試劑盒檢測(cè)。
　　4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料結(jié)果使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）來(lái)表示，各組間比較采用單因素方差分析。多重比較則應(yīng)用LSD、SNK-q檢驗(yàn)分析。P<0.05則認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1各組大鼠血糖、胰島素、糖化血紅蛋白、胰島素抵抗指數(shù)、肝糖原含量的變化（見Table1, Fig.1）：
　　

5、糖尿病組與對(duì)照組相比，空腹血糖、糖化血紅蛋白、胰島素抵抗指數(shù)均升高（P<0.05）。姜黃素化合物低、中、高劑量干預(yù)后三組與糖尿病組相比，血糖、糖化血紅蛋白均有下降（P<0.05），其中中劑量效果最好，高劑量次之（P<0.05）；中劑量及高劑量組的胰島素抵抗指數(shù)亦下降，中劑量組效果優(yōu)于高劑量組（P<0.05），低劑量與糖尿病組相比則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　糖尿病組與正常組比較，肝糖原含量下降（P<0.05）；姜黃素低中高

6、劑量三組與糖尿病組比較，肝糖原含量升高，其中中劑量升高最明顯，高劑量次之（P<0.05）。
　　2各組大鼠Egr-1、G-6-P、PEPCK的mRNA表達(dá)水平（見Table2, Fig.2）
　　糖尿病組與正常組相比，Egr-1、G-6-P、PEPCK的mRNA水平升高（P<0.05）；姜黃素低中高劑量三組和糖尿病組相比，Egr-1、G-6-P、PEPCK的mRNA水平均降低（P<0.05），均為中劑量組降低最顯著。

7、　　3各組大鼠Egr-1、G-6-P、PEPCK的蛋白表達(dá)水平（見Table3, Fig.3-4）
　　糖尿病組與正常組相比，Egr-1、G-6-P及PEPCK的蛋白表達(dá)水平均明顯升高（P<0.05）。姜黃素低中高劑量三組和糖尿病組相比，Egr-1及PEPCK的蛋白表達(dá)水平均降低，其中中劑量降低顯著，高劑量次之，低劑量最差（P<0.05）；姜黃素低中劑量組的G-6-P水平亦有下降（P<0.05），中劑量效果好于低劑量（P<0.05

8、），高劑量與糖尿病組相比無(wú)差異（P>0.05）。
　　4各組大鼠Egr-1與C/EBPα結(jié)合體的DNA的水平（見Table2, Fig.2）
　　糖尿病組和正常組相比，Egr-1與C/EBPα結(jié)合體的DNA水平增高（P<0.05），姜黃素低中高劑量三組與糖尿病組相比均有下降趨勢(shì)，中劑量降低效果顯著，高劑量次之，低劑量最差（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1姜黃素低中高劑量組均可降低糖尿病大鼠血糖、糖化血紅蛋白、