姜黃素對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景及目的：
　　糖尿病(Diabetesmellitus，DM)是一組以長(zhǎng)期高血糖為主要特征的代謝綜合征。糖尿病腎病(diabeticnephropathy，DN)是糖尿病的主要慢性并發(fā)癥之一，是一種腎小球病變癥其主要特征是血管損害，DN已成為發(fā)達(dá)國(guó)家終末期腎衰竭的首要原因。目前對(duì)DN的治療主要包括控制血壓和血糖、血液凈化、干細(xì)胞移植、腎移植等手段，但這些治療存在副作用多、價(jià)格昂貴、腎源難以尋找等缺點(diǎn)。因此如何獲得一種安全有效方

2、法阻止或逆轉(zhuǎn)早期DN，成為科研工作者共同關(guān)心的課題。
　　DN是多種細(xì)胞因子和激素對(duì)高血糖的綜合反應(yīng)的結(jié)果，其發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜，目前未完全闡明，有研究表明DN與氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子、炎癥反應(yīng)、生化代謝紊亂、腎小球血液動(dòng)力學(xué)改變等多因素密切相關(guān)，同時(shí)這些因素在DN發(fā)病機(jī)理中起著關(guān)鍵作用。
　　姜黃素(curcumin，Cur)是從姜黃中提取的酚性色素，具有抗氧化、抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化、促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)和抗腎纖維化作用等廣泛藥理作用，

3、且毒副作用低，具有良好的臨床應(yīng)用潛力[3]，近年來運(yùn)用Cur從調(diào)節(jié)免疫和抗炎角度治療DN已逐漸成為一種新的臨床治療方法。
　　本研究就是在構(gòu)建DN大鼠模型的基礎(chǔ)上，檢測(cè)、分析Cur對(duì)DN大鼠腎臟氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)影響，探討Cur對(duì)DN大鼠腎臟保護(hù)作用，尋求Cur對(duì)DN大鼠腎臟保護(hù)作用的可能機(jī)制，為Cur的進(jìn)一步開發(fā)、利用及其更有效地臨床治療提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。
　　方法:
　　68只清潔級(jí)SD雄性大鼠按體重隨機(jī)分為

4、正常組12只和DN大鼠模型組56只。模型組單次腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg，正常組腹腔注射等量枸櫞酸緩沖液。將造模成功的48只雄性大鼠，隨機(jī)分為模型組12只，Cur治療組36只，Cur治療組分為:Cur低劑量組（50mg/kg/d）12只，Cur中劑量組（100mg/kg/d）12只，Cur高劑量組(200mg/kg/d)12只。Cur治療組給予相應(yīng)濃度的Cur混懸液灌胃，正常組和模型組則給予等體積10g/L羧甲基纖維素鈉

5、灌胃。連續(xù)給藥8周后處死所有大鼠，取腎組織進(jìn)行病理染色，觀察腎組織形態(tài)變化，用可見光法、比色法、硫代巴比妥酸縮合法檢測(cè)DN大鼠腎組織中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)腎組織中白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、白細(xì)胞介素-18(IL-18)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、趨化因子5(Chemokine

6、ligand5，CCL5)及血清中高敏C反應(yīng)蛋白水平(hs-CRP)含量。檢測(cè)姜黃素對(duì)DN大鼠血糖(BG)、血尿素氮(BUN)、游離脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHOL)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、肌酐清除率(Ccr)水平的影響，
　　結(jié)果:
　　1.與正常組比較，模型組大鼠逐漸出現(xiàn)多飲、多尿、多食、消瘦以及反應(yīng)遲鈍、毛發(fā)枯黃、尾巴蒼白濕冷、精神萎靡等現(xiàn)象;與模型組比較，Cur低劑量組大鼠狀態(tài)改善不明顯;

7、Cur中、高劑量組進(jìn)食量、飲水量、尿量明顯減少，毛色明顯轉(zhuǎn)好，體重增加，自發(fā)活動(dòng)亦明顯改善。
　　2.與正常組比較，模型組大鼠腎質(zhì)量(KW)、腎質(zhì)量/體重(KW/BW)明顯升高，體重(BW)明顯下降;與模型組比較，Cur低劑量組變化不明顯;Cur中、高劑量組大鼠KW、KW/BW明顯下降，BW明顯升高。
　　3.與正常組比較，模型組大鼠BG、HbA1c、FFA、TG、BUN、Ccr明顯升高，CHOL無明顯變化。與模型組比較，C

8、ur低劑量組變化不明顯;Cur中、高劑量組大鼠BG、HbA1c、FFA、CHOL、BUN、Ccr明顯降低，TG有下降趨勢(shì)但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.與正常組比較，模型組大鼠腎組織CAT、GSH-Px、SOD活力明顯降低;與模型組比較，Cur低劑量組變化不明顯;Cur中、高劑量組大鼠腎組質(zhì)CAT、GSH-Px、SOD活力明顯升高，MDA的含量明顯降低。
　　5.與正常組比較，模型組大鼠腎勻漿IL-6、IL-18、CCL5、TNF

9、-α明顯升高，IL-10明顯降低、血清中hs-CRP的含量亦顯著升高;與模型組比較，Cur低劑量組變化不明顯;Cur中、高劑量組大鼠腎勻漿IL-6、IL-18、CCL5、TNF-α、hs-CRP含量明顯降低;而IL-10的含量顯著升高。
　　6.與正常組比較，模型組腎小球細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)增生，基底膜增厚，腎小管間質(zhì)纖維化，腎小球硬化;與模型組比較，Cur低劑量組變化不明顯;Cur中、高劑量組上述病變明顯減輕。
　　提示姜

10、黃素對(duì)STZ誘導(dǎo)的DN大鼠的腎臟有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制糖尿病大鼠氧化應(yīng)激、降低炎性因子含量有關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.Cur對(duì)DN大鼠腎臟具有保護(hù)作用
　　本研究結(jié)果顯示，Cur可改善DN大鼠的一般狀況，明顯降低糖尿病大鼠BG、HbA1c、FFA、TG、BUN、Ccr、KW、KW/BW(P＜0.01);顯著增加DN大鼠BW(P＜0.01)。表明Cur對(duì)DN大鼠腎臟有保護(hù)作用。
　　2.Cur對(duì)DN大鼠

11、腎保護(hù)作用的可能機(jī)制
　　綜合研究結(jié)果分析，Cur可降低DN大鼠腎組織MDA水平，提高DN大鼠腎組織CAT、SOD和GSH-Px的活力，同時(shí)亦可降低DN大鼠血清中hs-CRP含量及腎勻漿TNF-α、IL-6、IL-18、CCL5水平，提高IL-10水平，提示姜黃素可能對(duì)DN大鼠的保護(hù)作用與其抑制氧化應(yīng)激、增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，提高抗炎因子表達(dá)，抑制促炎因子表達(dá)有關(guān)，從而起到抑制腎小球細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)增生、基底膜增厚、腎小球硬化和