九香蟲水提液對(duì)錳誘導(dǎo)SD大鼠生殖損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：研究九香蟲水提液對(duì)生殖系統(tǒng)損傷的雄性大鼠生殖的保護(hù)作用。
　　方法：50只雄性SD大鼠(體重180-200g)，隨機(jī)分為空白對(duì)照組（Control）、模型組（Mn）和九香蟲低、中、高劑量干預(yù)組（即Asp50+Mn，Asp100+Mn, Asp200+Mn），10只/組。模型組和九香蟲干預(yù)組腹腔注射等容的30mg/kg的氯化錳溶液(MnCl2·4H2O)5d/w，1次/d，共2周；同時(shí)灌胃給予蒸餾水和相應(yīng)劑量的九香蟲水提液（5

2、0mg/kg,100mg/kg,200mg/kg），空白對(duì)照組給予生理鹽水（NS），7d/w，1次/d，共4周。觀察和檢測(cè)SD大鼠的生殖能力指標(biāo)（大鼠精子數(shù)目、睪丸和附睪的臟器系數(shù)等），取各組雄性SD大鼠睪丸和血清做以下檢測(cè)：1.蘇木精-伊紅（HE）染色觀察睪丸結(jié)構(gòu)；2. Western blot和免疫組化法檢測(cè)睪丸凋亡相關(guān)蛋白和基因Bcl-2、Bax、P-p53、Cytochrome C(CytC)、Cleaved Caspase-3

3、(C-Cas3)的表達(dá)情況；3. WST-1法檢測(cè)大鼠血清和睪丸T-SOD活力；4.酶促法檢測(cè)大鼠血清和睪丸GSH-PX活力;5.化學(xué)比色法檢測(cè)大鼠血清和睪丸T-AOC活力；6.硫代巴比妥酸(TBA)法檢測(cè)大鼠血清和睪丸MDA含量。
　　結(jié)果：1、九香蟲水提液對(duì)錳損傷的精子數(shù)和睪丸及附睪臟器系數(shù)的影響：模型組精子數(shù)量、睪丸及附睪臟器系數(shù)均低于九香蟲干預(yù)組和空白組（P<0.05）；2、九香蟲水提液對(duì)錳損傷的睪丸組織形態(tài)的影響：九香蟲

4、水提液修復(fù)干預(yù)后，睪丸組織中生精上皮細(xì)胞增多，各級(jí)生精細(xì)胞排列有序，生精小管的管腔逐漸變小，基膜得以修復(fù)到完整，九香蟲高劑量組的形態(tài)結(jié)構(gòu)與空白對(duì)照組基本一致；3、九香蟲水提液對(duì)錳損傷的睪丸和血清的抗氧化酶系統(tǒng)的影響：模型組的睪丸組織和血清中T-SOD、T-AOC、GSH-PX活力均組低于空白對(duì)照組和九香蟲干預(yù)組（P<0.05），而模型組的MDA高于空白對(duì)照組和九香蟲干預(yù)組（P<0.05）；4、九香蟲水提液對(duì)錳損傷的Bcl-2表達(dá)的影響：

5、與模型組相比，對(duì)照組和各九香蟲干預(yù)組Bcl-2的免疫組化陽(yáng)性著色和蛋白相對(duì)表達(dá)量均較模型組偏高（P<0.05），且隨九香蟲水提液劑量的增加而增強(qiáng)（P<0.05）；5、九香蟲水提液對(duì)錳損傷的睪丸凋亡相關(guān)蛋白BAX、P-P53、Cyt C、C-Cas3表達(dá)的影響：與模型組相比，對(duì)照組和各九香蟲干預(yù)組BAX、P-P53、Cyt C、C-Cas3的免疫組化陽(yáng)性著色和蛋白相對(duì)表達(dá)量均較模型組偏低（P<0.05），并且隨著九香蟲水提液劑量的增加而減

6、弱（P<0.05）。
　　結(jié)論：1、九香蟲水提液對(duì)生殖系統(tǒng)損傷雄性大鼠的精子數(shù)和睪丸及附睪臟器有明顯改善；2、九香蟲水提液修復(fù)雄性SD大鼠生殖系統(tǒng)損傷的機(jī)制可能為：（1）通過(guò)增加雄性大鼠血清和睪丸抗氧化酶活性，減少其體內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài)，阻止生殖系統(tǒng)的脂質(zhì)過(guò)氧化而抑制生精細(xì)胞凋亡；（2）通過(guò)下調(diào)P-p53，抑制Bax表達(dá)，進(jìn)而使Bcl-2表達(dá)增多，Bcl-2和Bax的異源二聚體增多，抑制生精細(xì)胞凋亡；同時(shí)，上調(diào)Bcl-2的表達(dá)抑制Cy