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1、目的:建立小鼠胡須觸覺和氣味嗅覺之間相互聯(lián)系的聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶動(dòng)物模型,運(yùn)用電生理實(shí)驗(yàn)方法,研究模型建立后小鼠對(duì)于觸覺信息和嗅覺信息在雙側(cè)大腦半球不對(duì)稱儲(chǔ)存的神經(jīng)基礎(chǔ)。
方法:
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立:選擇新出生15天的昆明小白鼠,以乙酸丁酯為氣味源作為條件刺激,非條件刺激為5Hz的右側(cè)胡須觸覺刺激,連續(xù)聯(lián)合訓(xùn)練10天,建立小鼠胡須觸覺和嗅覺的條件反射動(dòng)物模型。
2.行為學(xué)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)分組為聯(lián)合訓(xùn)練組(CR)和
2、空白對(duì)照組(Control)??瞻讓?duì)照組不做任何訓(xùn)練,聯(lián)合訓(xùn)練組采用上述方法建立動(dòng)物模型。每天訓(xùn)練結(jié)束后,給予小鼠乙酸丁酯氣味刺激并使用高清攝像機(jī)拍攝左側(cè)和右側(cè)的胡須擺動(dòng)情況,之后使用軟件處理分析小鼠胡須的擺動(dòng)動(dòng)頻率。T迷宮實(shí)驗(yàn)用來檢測(cè)小鼠嗅覺和觸覺與雙側(cè)大腦半球之間的聯(lián)系,實(shí)驗(yàn)過程中分別給予小鼠左側(cè)和右側(cè)胡須刺激,檢測(cè)其在T迷宮中對(duì)于乙酸丁酯的選擇變化。
3.局部場(chǎng)電位實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組和聯(lián)合訓(xùn)練組。選擇出生后15天的
3、昆明小白鼠,入組狀態(tài)良好,胡須發(fā)育及擺動(dòng)正常。對(duì)照組不做任何處理,聯(lián)合組進(jìn)行10天的訓(xùn)練。取小鼠稱重后,用20%的烏拉坦以0.1ml/10g進(jìn)行腹腔注射麻醉,剪開頭皮暴露顱骨,止血,涂抹少量鹽酸利多卡因。在立體定位儀上將小鼠固定,分別對(duì)小鼠左側(cè)和右側(cè)桶狀皮層進(jìn)行定位,而后進(jìn)行開顱手術(shù)。使用電動(dòng)顯微操作器將電極插入桶狀皮層,在給予小鼠5Hz機(jī)械振動(dòng)刺激和乙酸丁酯嗅覺刺激,分別記錄小鼠左側(cè)和右側(cè)桶狀皮層的場(chǎng)電位信號(hào)。
結(jié)果:
4、> 1.行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
?。?)經(jīng)聯(lián)合式學(xué)習(xí)訓(xùn)練后的小鼠左側(cè)和右側(cè)胡須擺動(dòng)頻率較正常組明顯增加(P<0.01),且右側(cè)即訓(xùn)練側(cè)胡須的擺動(dòng)頻率比左側(cè)未訓(xùn)練側(cè)的擺動(dòng)頻率有所增加(P<0.05)。
?。?)T迷宮結(jié)果顯示,聯(lián)合組小鼠對(duì)于T迷宮的選擇性優(yōu)于正常組小鼠,其逃避乙酸丁酯的成功概率明顯大于正常組小鼠(P<0.01),且聯(lián)合組內(nèi)刺激右側(cè)胡須比刺激左側(cè)胡須躲避乙酸丁酯的概率大(P<0.05)。
2.局部場(chǎng)電位
5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
?。?)在聯(lián)合訓(xùn)練組小鼠的左側(cè)和右側(cè)桶狀皮層都可以記錄到右側(cè)胡須的觸覺信號(hào)和乙酸丁酯的氣味信號(hào),且左側(cè)記錄到的信號(hào)幅度和頻率都要大于右側(cè)。
?。?)在正常對(duì)照組小鼠的左側(cè)桶狀皮層可以記錄到右側(cè)胡須的觸覺信號(hào),但是記錄不到乙酸丁酯的氣味信號(hào);在其右側(cè)桶狀皮層也記錄不到觸覺信號(hào)和嗅覺信號(hào)。
結(jié)論:
1.小鼠在經(jīng)胡須觸覺-嗅覺聯(lián)合訓(xùn)練后,桶狀皮層產(chǎn)生了跨感覺模式可塑性,可以對(duì)嗅覺信息產(chǎn)生反應(yīng)。<
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