吡格列酮抑制靜脈橋內(nèi)膜增生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:冠狀動(dòng)脈旁路手術(shù)(CABG)仍是目前治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的主要措施之一，尤其對(duì)于那些病變嚴(yán)重的患者，靜脈橋依然是目前用于搭橋術(shù)的主要移植材料，但是即便手術(shù)過(guò)程十分順利，術(shù)后發(fā)生靜脈移植物的狹窄甚至閉塞仍然是不可避免的，雖然阿司匹林、他汀類藥物治療，“no-touch”技術(shù)以及血管外支架的應(yīng)用能夠一定程度改善搭橋術(shù)后靜脈橋的通暢率，為CABG術(shù)后預(yù)防和治療靜脈橋再狹窄疾病提供了多種選擇，但實(shí)際上，靜脈橋移植術(shù)后中遠(yuǎn)期的通暢率

2、并無(wú)明顯改觀，如何獲得靜脈橋術(shù)后長(zhǎng)期有效的通暢率仍然是臨床一大難題。本研究將通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究吡格列酮(PIO)對(duì)移植靜脈橋內(nèi)膜增生的作用，并嘗試探討可能機(jī)制，為臨床應(yīng)用及科研提供參考。
　　方法:隨機(jī)選取32只雄性SD大鼠(Sprague-Dawley rats)，體重220±20g，隨機(jī)分為吡格列酮組(PIO組，n=16)和安慰劑對(duì)照組(NC組，n=16)，術(shù)前1周分別按(3mg.kg-1.d-1)劑量給予PIO或生理鹽水灌胃，

3、預(yù)處理結(jié)束后對(duì)各組大鼠分別行自體右頸外靜脈-頸總動(dòng)脈移植術(shù)，術(shù)后繼續(xù)給予原方案干預(yù)，并分別于術(shù)后第2周和第4周處死模型大鼠，采集移植靜脈橋備后續(xù)實(shí)驗(yàn)。制備組織病理切片，應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析軟件測(cè)量新生內(nèi)膜的厚度;提取組織蛋白，蛋白印記技術(shù)(western bolt)檢測(cè)ERK1/2磷酸化激活情況。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分，按照①DMSO組;②PIO1組(10μmol/L PIO+ PDGF-BB);(③ PIO1組(100μmol/L PIO+P

4、DGF-BB);(④(DMSO+PDGF-BB)組建立人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞(HS-VSMCs)培養(yǎng)模型，干預(yù)24小時(shí)后采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖，TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:接受自體右頸外靜脈-頸總動(dòng)脈移植術(shù)后，第2周時(shí)新生內(nèi)膜厚度比較，PIO組(8.56±1.64μm，n=8)小于NC組(25.44±0.89μm，n=8)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);第4周時(shí)內(nèi)膜增生厚度比較，PIO組(10.51±1.47

5、μm，n=8)小于NC組(35.69±1.07μm，n=8)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01); westernbolt檢測(cè)，比較術(shù)后2周血管壁組織ERK1/2的磷酸化表達(dá)灰度比值，PIO組(0.91±0.01)小于NC組(1.28±0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)24小時(shí)增殖檢測(cè)，各組的OD值分別為DMSO組0.44±0.01，PDGF組3.81±0.10，PIO1組1.76±0.01，PIO2組1.

6、68±0.01，增殖情況比較，PDGF組大于DMSO組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，其余兩組與DMSO照組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），均小于PDGF組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，劑量組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;凋亡檢測(cè)，兩劑量組凋亡率均大于陰性對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，低劑量組小于高劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論:口服PIO能有效抑制移植靜脈橋術(shù)后內(nèi)膜增