多溴聯(lián)苯醚的生殖發(fā)育毒性研究.pdf

1、多溴聯(lián)苯醚（Polybrominated Diphenyl Ethers，PBDEs）是新型持久性有機污染物。自Main KM等2007年首次報道隱睪癥患兒的患病率與母乳中PBDEs濃度存在關(guān)聯(lián)后，針對PBDEs的生殖毒性成為眾多學者關(guān)注的研究熱點。
　　目前，關(guān)于PBDEs暴露與人類生殖發(fā)育之間關(guān)系的人群研究資料非常有限。有關(guān)PBDEs生殖毒性的動物試驗雖然不斷增多，但針對青春期暴露于PBDEs對雄性生殖系統(tǒng)影響的系統(tǒng)報道較少，

2、且所用染毒劑量遠高于實際生活中人群的暴露水平，缺乏對應于人群暴露水平的低劑量毒性研究資料。
　　針對上述研究不足，本研究首先通過山東某濱海開發(fā)區(qū)建立的出生隊列，就新生兒PBDEs暴露水平及其影響開展前瞻性研究；然后以人群暴露水平作為劑量參考，建立低劑量染毒動物模型，系統(tǒng)觀察青春期前后低劑量BDE-209暴露對雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育，特別是精子發(fā)育的影響；最后通過建立睪丸生殖細胞體外培養(yǎng)體系，探索PBDEs影響生殖健康的可能機制。

3、　　主要分三部分展開研究：
　　第一部分 某地新生兒多溴聯(lián)苯醚暴露水平調(diào)查及其生殖發(fā)育毒性的研究
　　目的：探討新生兒體內(nèi)PBDEs暴露水平，分析其暴露與新生兒宮內(nèi)妊娠結(jié)局的相關(guān)性。
　　方法：選擇山東省某濱海開發(fā)區(qū)孕婦作為研究對象，追蹤隨訪孕婦妊娠過程及妊娠結(jié)局，同時對新生兒臍帶血血清PBDEs水平進行測定，并對兩者關(guān)系進行相關(guān)分析。
　　結(jié)果：
　　新生兒所有血清樣本（n=176）均能檢測到一種或多種P

4、BDEs同系物。新生兒臍帶血清BDE-100（r=0.607，P<0.01）、BDE-47（r=0.352，P<0.05）、BDE-99（r=0.412，P<0.05）水平與其母親既往懷孕期間因胎兒不正常選擇人工流產(chǎn)呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)。新生兒血清BDE-153水平與新生兒身長呈顯著正相關(guān)（r=0.452，P<0.01）。
　　結(jié)論：山東某濱海開發(fā)區(qū)新生兒體內(nèi)普遍存在PBDEs暴露，新生兒體內(nèi)PBDEs水平與其宮內(nèi)不良妊娠發(fā)育結(jié)局存在

5、一定的關(guān)聯(lián)。
　　第二部分 雄性大鼠青春期前后十溴聯(lián)苯醚暴露的生殖發(fā)育毒性研究
　　目的：探討青春期前后BDE-209暴露對雄性大鼠性發(fā)育、生殖器腺發(fā)育、精子發(fā)育及生殖內(nèi)分泌功能的影響。
　　方法：24只SD雄性大鼠（4周齡）隨機分為4組，以不同濃度BDE-209（0、2、10、50 mg/kg.d）灌胃染毒，1次/d，連續(xù)染毒一個月。染毒結(jié)束后，采集樣本并分析。
　　結(jié)果：
　　1、與對照組相比，50 m

6、g/kg BDE-209染毒組睪丸抗氧化酶SOD、GSH-Px以及標記酶AKP活性均較對照組明顯下降（P<0.05），睪丸病理切片可見空泡樣變。但各染毒組在體重、肛殖距、陰莖包皮分離時間以及各臟器系數(shù)等方面未見明顯改變。
　　2、BDE-209染毒后，精子活力呈現(xiàn)出隨BDE-209濃度增高而明顯下降的趨勢（P<0.05），其中50 mg/kg組精子活力下降最為明顯（P<0.05）。BDE-209染毒組精子運動速率、前進運動精子率較

7、對照組也呈現(xiàn)出下降趨勢，其中50 mg/kg組精子運動速率下降具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。與此同時，BDE-209染毒組的精子畸形率較對照組明顯增高（P<0.05）。但未見BDE-209暴露對精子密度產(chǎn)生顯著性改變。
　　3、BDE-209染毒后，血清睪酮、血清雌二醇、睪丸組織睪酮含量與對照組相比，均未見顯著性改變（P＞0.05）。
　　結(jié)論：在本實驗設(shè)計劑量下，青春期前后BDE-209暴露對大鼠睪丸的形態(tài)功能已產(chǎn)生一定

8、的改變，尤其是對精子分化成熟過程產(chǎn)生了明顯影響，引起精子畸形率增加，精子活力下降，精子運動速率降低。
　　第三部分 體外培養(yǎng)睪丸支持細胞暴露于十溴聯(lián)苯醚的毒性研究
　　目的：探討B(tài)DE-209對睪丸支持細胞的毒性作用。
　　方法：選用18天齡SD大鼠，取睪丸支持細胞進行原代培養(yǎng)，給予BDE-209染毒24 h，采用MTT法測定細胞濃度，同時利用Annexin V-FITC試劑盒檢測支持細胞的凋亡情況。
　　結(jié)果：

9、
　　1、大鼠睪丸支持細胞在培養(yǎng)36h后進入對數(shù)增長期，48-72h是適宜的染毒窗口期。不同濃度BDE-209染毒24h后，隨染毒濃度增加，細胞存活率下降，其中當BDE-209濃度≥30μg/ml時，睪丸支持細胞的相對存活率較對照組明顯降低(P<0.05)。
　　2、與對照組相比，BDE-209染毒組支持細胞T-AOC、SOD呈現(xiàn)下降趨勢，其中10、20μg/ml染毒組T-AOC、SOD活性較對照組明顯下降（P<0.05）。