牙齦干細(xì)胞對(duì)小鼠放射性口炎預(yù)防及治療作用的初步探討.pdf

1、目的:通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，分別于放射前、后，將牙齦干細(xì)胞(GMSCs)通過尾靜脈注射系統(tǒng)應(yīng)用，觀察GMSCs對(duì)小鼠放射性口炎(RTOM)的預(yù)防及治療作用。
　　方法:1.分離培養(yǎng)C57/BL小鼠牙齦干細(xì)胞
　　2.建立C57/BL小鼠放射性口炎病理模型，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為四組:預(yù)防性實(shí)驗(yàn)組32只:照射前30min尾靜脈注射1×106GMSCs，預(yù)防性實(shí)驗(yàn)對(duì)照組32只:于照射前30min尾靜脈注射無細(xì)胞培養(yǎng)基;治療性實(shí)驗(yàn)組32只:放

2、射后第七天尾靜脈注射牙齦干細(xì)胞1×106GMSCs，治療性實(shí)驗(yàn)對(duì)照組32只:在放射后第7天僅注射無細(xì)胞培養(yǎng)液。觀察各個(gè)時(shí)間點(diǎn)小鼠RTOM臨床分級(jí)并統(tǒng)計(jì)分析，以探討GMSCs對(duì)小鼠RTOM的預(yù)防及治療作用。
　　結(jié)果:1 C57/BL小鼠牙齦干細(xì)胞的分離培養(yǎng)原代細(xì)胞取自6-8周健康C57/BL小鼠牙齦（雌雄均可），培養(yǎng)3d時(shí)可見單一細(xì)胞增殖為集落，細(xì)胞為典型的成纖維細(xì)胞形態(tài)。第2-6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。
　　2小鼠病理模型的建立采

3、用Primus6MeV電子線直線加速器，25Gy單次局部照射，建立C57/BL小鼠的RTOM模型。第三天51％實(shí)驗(yàn)小鼠出現(xiàn)舌，唇充血癥狀，照射第七天時(shí)，部分小鼠開始出現(xiàn)唇部糜爛，舌體充血水腫。照射第十天時(shí)，出現(xiàn)小鼠死亡現(xiàn)象。但該實(shí)驗(yàn)中未出現(xiàn)臨床Ⅲ級(jí)及以上癥狀的小鼠，而昆明小鼠以相同照射方式及劑量亦出現(xiàn)RTOM，且在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)上其臨床癥狀較C57/BL小鼠為重，并出現(xiàn)臨床Ⅲ級(jí)癥狀。
　　3體內(nèi)實(shí)驗(yàn)
　　3.1預(yù)防性實(shí)驗(yàn)

4、　　對(duì)照組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第三天14只小鼠無明顯癥狀，15只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級(jí)癥狀，3只小鼠死亡，RTOM發(fā)生率為52％。第7天22只為臨床Ⅰ級(jí)，7只為臨床Ⅱ級(jí)，RTOM發(fā)生率為100％。第10天10只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級(jí)癥狀，17只為臨床Ⅱ級(jí)，2只小鼠死亡，RTOM發(fā)生率為100％。
　　實(shí)驗(yàn)組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第三天15只小鼠無明顯癥狀，13只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級(jí)癥狀，4只小鼠死亡，RTOM發(fā)生率為46

5、％;第七天8只小鼠無明顯癥狀，16只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級(jí)癥狀，4只小鼠為臨床Ⅱ級(jí)表現(xiàn)，RTOM發(fā)生率為71％;第十天6只小鼠無明顯癥狀，17只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級(jí)癥狀，5只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅱ級(jí)癥狀，RTOM發(fā)生率為82％。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示第三天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組發(fā)生率及臨床分級(jí)無明顯差異(P＞0.05）;第七天，第十天實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比發(fā)生率及臨床分級(jí)有顯著性差異（P＜0.05），提示GMSCs對(duì)RTOM的早期發(fā)生率無明顯影響但對(duì)減輕臨床癥狀有一定的作

6、用。
　　3.2治療性實(shí)驗(yàn)
　　對(duì)照組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第7天（注射第0天）32只小鼠均出現(xiàn)臨床癥狀其中22只為臨床Ⅰ級(jí)，6只為臨床Ⅱ級(jí)，4只小鼠死亡;第10天（注射后第3天）8只小鼠為臨床Ⅰ級(jí)，18只小鼠為臨床Ⅱ級(jí)，2只小鼠死亡;第14天時(shí)（注射后第7天）18只小鼠仍為臨床Ⅱ級(jí)，且口周已出現(xiàn)明顯褪毛，全身皮毛無光澤，精神不振，8只小鼠死亡。
　　實(shí)驗(yàn)組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第7天（注射第0

7、天），小鼠全部出現(xiàn)臨床癥狀，其中臨床Ⅰ級(jí)24只，臨床Ⅱ級(jí)5只，3只小鼠死亡;放射后第10天（注射第3天），6只小鼠無明顯癥狀，臨床Ⅰ級(jí)癥狀小鼠15只，臨床Ⅱ級(jí)小鼠7只，1只小鼠死亡;放射第14天（注射后第7天）時(shí)9只小鼠無明顯癥狀，11只小鼠為臨床Ⅰ級(jí)癥狀，8只小鼠為臨床Ⅱ級(jí)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:兩組的臨床分級(jí)有明顯差異（P＜0.05)，提示GMSCs對(duì)小鼠RTOM有一定的治療作用。
　　結(jié)論:GMSCs對(duì)預(yù)防小鼠早期放射性口炎的發(fā)生無