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文檔簡介
1、目的:通過動物實驗,分別于放射前、后,將牙齦干細胞(GMSCs)通過尾靜脈注射系統(tǒng)應用,觀察GMSCs對小鼠放射性口炎(RTOM)的預防及治療作用。
方法:1.分離培養(yǎng)C57/BL小鼠牙齦干細胞
2.建立C57/BL小鼠放射性口炎病理模型,將實驗動物隨機分為四組:預防性實驗組32只:照射前30min尾靜脈注射1×106GMSCs,預防性實驗對照組32只:于照射前30min尾靜脈注射無細胞培養(yǎng)基;治療性實驗組32只:放
2、射后第七天尾靜脈注射牙齦干細胞1×106GMSCs,治療性實驗對照組32只:在放射后第7天僅注射無細胞培養(yǎng)液。觀察各個時間點小鼠RTOM臨床分級并統(tǒng)計分析,以探討GMSCs對小鼠RTOM的預防及治療作用。
結果:1 C57/BL小鼠牙齦干細胞的分離培養(yǎng)原代細胞取自6-8周健康C57/BL小鼠牙齦(雌雄均可),培養(yǎng)3d時可見單一細胞增殖為集落,細胞為典型的成纖維細胞形態(tài)。第2-6代細胞用于實驗。
2小鼠病理模型的建立采
3、用Primus6MeV電子線直線加速器,25Gy單次局部照射,建立C57/BL小鼠的RTOM模型。第三天51%實驗小鼠出現(xiàn)舌,唇充血癥狀,照射第七天時,部分小鼠開始出現(xiàn)唇部糜爛,舌體充血水腫。照射第十天時,出現(xiàn)小鼠死亡現(xiàn)象。但該實驗中未出現(xiàn)臨床Ⅲ級及以上癥狀的小鼠,而昆明小鼠以相同照射方式及劑量亦出現(xiàn)RTOM,且在相應時間點上其臨床癥狀較C57/BL小鼠為重,并出現(xiàn)臨床Ⅲ級癥狀。
3體內(nèi)實驗
3.1預防性實驗
4、 對照組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第三天14只小鼠無明顯癥狀,15只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級癥狀,3只小鼠死亡,RTOM發(fā)生率為52%。第7天22只為臨床Ⅰ級,7只為臨床Ⅱ級,RTOM發(fā)生率為100%。第10天10只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級癥狀,17只為臨床Ⅱ級,2只小鼠死亡,RTOM發(fā)生率為100%。
實驗組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第三天15只小鼠無明顯癥狀,13只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級癥狀,4只小鼠死亡,RTOM發(fā)生率為46
5、%;第七天8只小鼠無明顯癥狀,16只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級癥狀,4只小鼠為臨床Ⅱ級表現(xiàn),RTOM發(fā)生率為71%;第十天6只小鼠無明顯癥狀,17只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅰ級癥狀,5只小鼠出現(xiàn)臨床Ⅱ級癥狀,RTOM發(fā)生率為82%。統(tǒng)計結果顯示第三天時,實驗組與對照組發(fā)生率及臨床分級無明顯差異(P>0.05);第七天,第十天實驗組與對照組相比發(fā)生率及臨床分級有顯著性差異(P<0.05),提示GMSCs對RTOM的早期發(fā)生率無明顯影響但對減輕臨床癥狀有一定的作
6、用。
3.2治療性實驗
對照組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第7天(注射第0天)32只小鼠均出現(xiàn)臨床癥狀其中22只為臨床Ⅰ級,6只為臨床Ⅱ級,4只小鼠死亡;第10天(注射后第3天)8只小鼠為臨床Ⅰ級,18只小鼠為臨床Ⅱ級,2只小鼠死亡;第14天時(注射后第7天)18只小鼠仍為臨床Ⅱ級,且口周已出現(xiàn)明顯褪毛,全身皮毛無光澤,精神不振,8只小鼠死亡。
實驗組:32只6-8周健康小鼠接受放射后第7天(注射第0
7、天),小鼠全部出現(xiàn)臨床癥狀,其中臨床Ⅰ級24只,臨床Ⅱ級5只,3只小鼠死亡;放射后第10天(注射第3天),6只小鼠無明顯癥狀,臨床Ⅰ級癥狀小鼠15只,臨床Ⅱ級小鼠7只,1只小鼠死亡;放射第14天(注射后第7天)時9只小鼠無明顯癥狀,11只小鼠為臨床Ⅰ級癥狀,8只小鼠為臨床Ⅱ級。經(jīng)統(tǒng)計學分析:兩組的臨床分級有明顯差異(P<0.05),提示GMSCs對小鼠RTOM有一定的治療作用。
結論:GMSCs對預防小鼠早期放射性口炎的發(fā)生無
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