β-防御素-3-聚乳酸聚乙醇酸緩釋微球抑制人工關(guān)節(jié)術(shù)后生物膜形成的研究.pdf

1、近年來，外科手術(shù)技術(shù)、植入物材料以及生物力學(xué)方面有了長足的進(jìn)步，同時，患者的理念也逐漸發(fā)生了改變，人工關(guān)節(jié)置換術(shù)已經(jīng)成為治療骨性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及股骨頭壞死等嚴(yán)重關(guān)節(jié)病變的常規(guī)治療方案。手術(shù)后的良好效果和長時間的隨訪結(jié)果也使患者及醫(yī)生感到滿意。然而，自從人工關(guān)節(jié)置換術(shù)開展以來，感染一直是最嚴(yán)重也是最難治療的并發(fā)癥。針對感染的預(yù)防以及治療，時刻困擾著臨床醫(yī)生。人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染不僅給患者的身體和精神上帶來極大的創(chuàng)傷，感染的昂貴治

2、療費用對患者來說是巨大的經(jīng)濟壓力，同時術(shù)后感染也使醫(yī)護(hù)人員產(chǎn)生打擊和挫敗感。因此，對于一名關(guān)節(jié)外科醫(yī)生來說，積極預(yù)防并且正確治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感染是一門必修課。
　　目的:研究人β-防御素3（HBD-3）/聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球的制各方法及體外釋放藥物的性能。同時在動物體內(nèi)驗證人β-防御素3（HBD-3）/聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)微球治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后葡萄球菌感染以及阻止生物膜形成的可行性。
　　方法:

3、r>　　1.采用改良復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法，以PLGA作為藥物載體，HBD-3為藥物制備HBD-3/PLGA緩釋微球。使用掃描電鏡(SEM)觀察微球的物理性質(zhì)，微球的載藥量和包封率通過分光光度計測定。記錄HBD-3/PLGA微球的緩釋數(shù)據(jù)，分析微球在體外緩釋藥物的特點。
　　2.在體外實驗中，觀察不同濃度的HBD-3溶液和HBD-3/PLGA緩釋微球的抑菌環(huán)大小以及抑菌環(huán)的持續(xù)時間。
　　3.在體內(nèi)實驗中，建立兔人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后感

4、染模型，對動物感染模型分別處以關(guān)節(jié)腔內(nèi)置入HBD-3/PLGA緩釋微球、單純HBD-3陽性對照以及生理鹽水陰性對照，使用組織培養(yǎng)、電鏡掃描及激光共聚顯微鏡觀察及檢測HBD-3/PLGA緩釋微球和單純HBD-3在控制人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后葡萄球菌感染和抑制生物膜形成的效果。
　　結(jié)果:
　　1.在鏡下觀察HBD-3/PLGA緩釋微球的表面比較光滑，分布相對均勻，有一定的流動性，其平均粒徑為219.49nm，HBD-3的載藥量為(20

5、.67±0.17)％，包封率為(54.52±1.31)％，可以達(dá)到最低抑菌濃度的要求。
　　2.體外的緩釋實驗中HBD-3的釋藥情況相對均勻，25d累計釋藥量平均為(74.12±0.43)％。
　　3.在體外實驗中，單純HBD-3溶液和HBD-3/PLGA緩釋微球在培養(yǎng)皿上均出現(xiàn)抑菌環(huán)，第10d中單純HBD-3溶液的抑菌環(huán)為2.66mm，HBD-3/PLGA緩釋微球的抑菌環(huán)為8.92mm。
　　4.在動物體內(nèi)實驗中，單

6、純HBD-3溶液和HBD-3/PLGA緩釋微球組均觀察到細(xì)菌生物膜的生成受到抑制，其中HBD-3/PLGA緩釋微球組電鏡下細(xì)菌數(shù)量更少，抑制細(xì)菌生長及生物膜形成的時間更長。
　　結(jié)論:
　　1.使用改良復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法制備出的HBD-3/PLGA緩釋微球形態(tài)基本符合實驗前預(yù)估的要求。
　　2.體外實驗中HBD-3/PLGA緩釋微粒具有緩釋特性，相對于單純HBD-3抑制葡萄球菌生長的效果更加明顯和持久。
　　3.動