硫酸軟骨素及黃連素誘導(dǎo)小鼠腸菌失調(diào)及多系統(tǒng)病變的機(jī)理研究.pdf

1、目的:
　　隨著研究的不斷深入，腸道菌群對(duì)人類健康之間的聯(lián)系與影響已經(jīng)獲得了科學(xué)界的共識(shí)，但是由于腸道菌群種類繁多，組成復(fù)雜，并且有個(gè)體化的差異，所以腸道菌群與人體互相的作用尚有很多未知需要解決。肉食中包含的成分硫酸軟骨素作為保健品一直被用于骨關(guān)節(jié)損傷的輔助治療，然而有研究稱硫酸軟骨素做培養(yǎng)基有滋養(yǎng)細(xì)菌的作用。根據(jù)硫酸軟骨素能促進(jìn)某些腸道細(xì)菌過度生長的文獻(xiàn)報(bào)道，本研究擬采用灌胃硫酸軟骨素的方法造成小鼠腸道菌群失調(diào)的模型誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)

2、甚至炎癥性疾病，證實(shí)其對(duì)身體的間接影響，并且采用抗菌抗炎藥物，對(duì)腸道菌群失調(diào)模型的治療作用做出分析評(píng)估，為找出腸道菌群造成的不利因素和解決問題的方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　通過給小鼠灌胃適量硫酸軟骨素造成腸道失調(diào)模型，預(yù)期小鼠腸道硫酸酯酶分泌細(xì)菌與硫酸還原菌增多，硫化氫分泌過量導(dǎo)致腸道損傷。通過16SrRNA測序法分析小鼠腸道菌群組成、豐度和分類，結(jié)合測定炎癥指標(biāo)(LPS、TNFα、TLR4、CCL2、TNFR1、i

3、NOS)，阿茨海默癥指標(biāo)(Aβ、PS1)，缺氧指標(biāo)(HIF-1α、VEGF、EPO、CYCS)，腫瘤標(biāo)記物指標(biāo)(Cyclin D1、p21)，腸道細(xì)菌酶的表達(dá)水平指標(biāo)(sulfatase，ATPsulfurylase)，腸道損傷指標(biāo)(MUC1、MUC4、Slpi)，脂肪與脂肪肝指標(biāo)（油紅O染色、透射電鏡檢測），以評(píng)估腸菌失調(diào)模型對(duì)機(jī)體的損害。采用鹽酸黃連素作為治療藥物，頭孢噻肟鈉作為陽性對(duì)照藥物，對(duì)腸道菌群失調(diào)導(dǎo)致的炎癥的預(yù)防和治療效果

4、做一次初步的分析，以探討抗菌藥物對(duì)模型的效果。
　　結(jié)果:
　　硫酸軟骨素灌胃8周的小鼠腸道菌群均比對(duì)照組出現(xiàn)明顯的變化，主要體現(xiàn)為腸道細(xì)菌豐度的增加，硫酸酯酶與硫酸酯酶分泌細(xì)菌的增加和硫酸還原菌與H2S釋放的增加。在灌胃8周的小鼠4周時(shí)有小鼠出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎的癥狀，在灌胃12周的小鼠在8周時(shí)有小鼠出現(xiàn)腫瘤樣增生的癥狀。并且經(jīng)過ELISA測定，有關(guān)節(jié)炎的小鼠大腦、血清、肝臟和肌肉TNFα水平升高，但LPS水平降低;Aβ水平升高，P

5、S1水平降低;灌胃12周的小鼠脂肪TNFα水平升高，其他組織器官降低，但是缺氧因子在脂肪上都升高，且線粒體減少，腸道Slpi和MUC1、MUC4分泌增多，并出現(xiàn)脂肪肝樣病變。最后用鹽酸黃連素和頭孢噻肟鈉處理灌胃硫酸軟骨素和豬油4周的小鼠，結(jié)果抗生素處理的小鼠癥狀減輕，黃連素處理的硫酸軟骨素組小鼠癥狀加重。
　　結(jié)論:
　　硫酸軟骨素的有益或有害取決于個(gè)體腸道菌群的組成，它所造成的腸道菌群失調(diào)和腸道屏障破壞可誘發(fā)系統(tǒng)性炎癥及疾