活血降糖飲對糖尿病心肌病氧化應(yīng)激的作用和臨床研究.pdf

1、研究目的：
　　本研究旨在觀察活血降糖飲對糖尿病心肌病的治療作用及其對神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1/表皮生長因子(NRG1/ErbB)信號通路的調(diào)控作用，為活血降糖飲治療糖尿病心肌病提供理論依據(jù)，并嘗試從分子層面探討其作用機制。
　　研究方法：
　　1.臨床研究將符合糖尿病心肌病診斷標(biāo)準(zhǔn)50例患者隨機分為治療組25和對照組25例，其中醫(yī)辨證均符合氣虛血瘀證型，兩組均采取相同的基礎(chǔ)治療，包括糖尿病特殊飲食教育、控制血糖。對照組在基礎(chǔ)治

2、療加服貝那普利10mg，po，qd;治療組在對照組的基礎(chǔ)上加服活血降糖飲，水煎服，每日1劑，分2次服，以1個月為一個療程。觀察治療前后總有效率及中醫(yī)證候積分療效，測定治療前后生化指標(biāo)空腹血糖、餐后兩小時血糖、空腹胰島素、糖化血紅蛋白、總膽固醇、甘油三酯(FPG、2hPG、FINS、HbA1C、TC、TG);測定血漿超氧化物歧化酶、總抗氧化能力、谷胱甘肽過氧化物酶(SOD、T-AOC、GSH-PX)氧化應(yīng)激指標(biāo);測定左室收縮末期內(nèi)徑、左室

3、舒張末期內(nèi)徑、左心室射血分?jǐn)?shù)、6分鐘步行實驗(LVESD、LVEDD、LVEF、6MWT)心功能指標(biāo);測定血清腫瘤壞死因子-a(TNF-a)及白細(xì)胞介素-6（IL-6）炎性指標(biāo)進行比較。
　　2.雄性SD隨機分為對照組及處理組，處理組大鼠給予高糖高脂飲食4周后，用小劑量的鏈脲佐菌素(STZ30mg/kg)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型。將造模成功的大鼠隨機分為模型組，活血降糖飲低劑量組及高劑量組?；钛堤秋嫷蛣┝拷M每日灌服活血降糖飲水煎液(5

4、g/kg/d);高劑量組給予每日灌服活血降糖飲水煎液(10g/kg/d)處理。給藥8周后分別測定空腹血糖、甘油三酯、總膽固醇的含量、計算胰島素抵抗指數(shù)及胰島素敏感性，測定心肌細(xì)胞超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、丙二醛(SOD、GSH-Px、MDA)酶活性，并進行超聲心動圖檢測，心肌組織蘇木精-伊紅(HE)染色和TUNEL凋亡分析;此外，Q-PCR和Western blot分析NRG1、ErbB2、絲/蘇氨酸激酶(AKT)、Bax、B

5、cl-2表達水平。
　　研究結(jié)果：
　　一、臨床研究部分
　　(1)治療后兩組總有效率比較，治療組84％，高于對照組68％，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05);中醫(yī)證候積分比較，治療后兩組患者中醫(yī)癥狀積分均明顯降低（P＜0.05)，兩組治療前后差值比較，治療組明顯優(yōu)于對照組（P＜0.01)。
　　(2)治療后兩組患者FPG、2hPG、FINS、HbA1C、TC和TG水平顯著下降，且治療組顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計意義

6、（P＜0.05）。
　　(3)治療后兩組患者的SOD、T-AOC、GSH-PX水平均顯著高于同組治療前;差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;與對照組相比，治療組血漿SOD、T-AOC、GSH-PX水平均顯著升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(4)治療后兩組心功能指標(biāo)LVESD、LVEDD、LVEF、6MWT均明顯改善（P＜0.05）。與治療前相比，治療組LVESD、LVEDD明顯降低，且下降程度低于對照組(P＜

7、0.05); LVEF、6MWT均明顯升高，且升高程度高于對照組（P＜0.05）。
　　(5)炎性指標(biāo)TNF-a及IL-6治療后均有明顯下降（P＜0.05），且對照組優(yōu)于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　二、動物實驗部分
　　(1)模型組中大鼠空腹血糖與對照組相比，顯著性地增加(P＜0.05)，說明造模成功;活血降糖飲低劑量組及高劑量組處理后，使得空腹血糖降低，與模型組相比，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0

8、.05）;模型組中大鼠的血胰島素與對照組相比，出現(xiàn)了顯著上升的趨勢（P＜0.05）;而活血降糖飲低劑量組及高劑量組中大鼠的血胰島素與模型組相比均顯著性下降（P＜0.05），其含量接近對照組的水平。
　　(2)模型組中大鼠總膽固醇和甘油三酯的含量與對照組相比，均顯著性地增加(P＜0.05);活血降糖飲低劑量及高劑量組處理后，總膽固醇和甘油三酯的含量降低，與模型組相比，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(3)模型組心肌組織與

9、對照組相比SOD，GSH-Px活性明顯降低（P＜0.05），而活血降糖飲低劑量及高劑量組與模型組相比，均可使DCM大鼠心肌組織SOD，GSH-Px活性明顯升高（P＜0.05）。與對照組相比，模型組大鼠心肌組織MDA含量顯著升高;與模型組相比，活血降糖飲低劑量及高劑量組可使DCM大鼠心肌組織MDA含量明顯降低（P＜0.05）。
　　(4)模型組LVPWT、LVDD、LVDS增大，LVEF下降，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.

10、05)?；钛堤秋嫿M低劑量及高劑量組LVPWT、LVDD、LVDS、LVEF顯著改善，與模型組比較，結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(5)對照組心肌細(xì)胞排列緊密并且整齊，細(xì)胞核經(jīng)過染色，清晰可見;模型組心肌細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞肥大并且變形，細(xì)胞核染色較深，間質(zhì)纖維化明顯，有炎性細(xì)胞浸潤;活血降糖飲低劑量及高劑量組心肌細(xì)胞排列稍亂，細(xì)胞形態(tài)對照組相比，大體相同，核染色比較清晰。模型組中TUNEL染色陽性細(xì)胞數(shù)目與對照組相比，顯

11、著增加（P＜0.05）;活血降糖飲低劑量組及高劑量組相對于模型組比較，陽性染色細(xì)胞數(shù)目出現(xiàn)了下降趨勢，均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　(6) Western blot檢測各組NRG1、p-ErbB2、p-AKT、Bax、Bcl-2蛋白表達水平，模型組中NRG1、p-ErbB2、p-AKT和Bcl-2蛋白表達水平呈現(xiàn)出下降的趨勢，而Bax蛋白表達呈現(xiàn)出上升的趨勢，與對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05）;活血降糖飲組處理

12、后，其NRG1、p-ErbB2、p-AKT和Bcl-2表達與模型組相比顯著增加，Bax表達顯著降低，均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其改善程度呈劑量依懶性。
　　(7)熒光定量PCR分別檢測各組NRG1、ErbB2、AKT、Bax、Bcl-2 mRNA表達水平，模型組中NRG1、ErbB2、AKT和Bcl-2基因表達水平呈現(xiàn)出下降的趨勢，而Bax基因表達呈現(xiàn)出上升的趨勢，與對照組相比，具有顯著性差異（P＜0.05）;活血降糖飲組

13、處理后，其中NRG1、ErbB2、AKT和Bcl-2表達與模型組相比顯著增加，Bax表達顯著降低，均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其改善程度呈劑量依懶性。
　　結(jié)論：
　　1.氣陰兩虛是糖尿病心肌病的發(fā)病基礎(chǔ)，瘀血阻絡(luò)是糖尿病心肌病的重要致病因素，故以益氣養(yǎng)陰、活血化淤為基本治法的活血降糖飲對糖尿病心肌病患者有效。
　　2.活血降糖飲可改善糖尿病心肌病的糖脂代謝，改善患者機體氧化應(yīng)激狀態(tài)，下調(diào)炎癥因子TNF-a及IL