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文檔簡介
1、應(yīng)激(stress)是指機(jī)體對外界環(huán)境或機(jī)體內(nèi)部的任何有害因子的刺激所做出的非特異性應(yīng)答的全身反應(yīng)。機(jī)體在應(yīng)激后會呈現(xiàn)出頭痛、焦慮、注意力分散、失眠、免疫力降低、記憶能力減退和認(rèn)知功能障礙等癥狀。因此,積極研究應(yīng)激產(chǎn)生的相關(guān)原因和發(fā)病機(jī)制,篩選出具有一定預(yù)防和治療作用的抗應(yīng)激藥物,不僅對人類的身心健康具有重要的意義,而且還具有深遠(yuǎn)的醫(yī)學(xué)和社會意義。
在應(yīng)激的狀態(tài)下,血液中皮質(zhì)酮(corticosterone,cort)的含量會
2、增加,而皮質(zhì)酮可透過血腦屏障進(jìn)而影響海馬的突觸信息傳遞的功能,導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶的損傷。作為機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)的一個(gè)主要指標(biāo),皮質(zhì)酮(醇)不僅可以有效調(diào)節(jié)海馬的學(xué)習(xí)記憶能力,而且還與海馬突觸可塑性緊密相關(guān),尤其是CA1區(qū)的長時(shí)程抑制(long-termdrepression,LTD)和長時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP)。
白藜蘆醇(resveratrol,Res)可通過減少大腦細(xì)胞氧化應(yīng)激的水平、減少因
3、腦缺血導(dǎo)致自由基的破壞、減少情緒抑郁的發(fā)生和延緩老年癡呆的發(fā)生從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。白藜蘆醇所具有的神經(jīng)保護(hù)作用不僅能夠恢復(fù)血液中皮質(zhì)酮的水平,還能夠改善皮質(zhì)酮所致的學(xué)習(xí)記憶的損傷。
目的:
本研究選用皮質(zhì)酮(cort)模擬動物體內(nèi)應(yīng)激狀態(tài)建立體內(nèi)模型,探討皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響及其作用機(jī)制和白藜蘆醇對此種影響的調(diào)節(jié)作用。
方法:
1.不同刺激頻率對小鼠海馬PP-DG通路突
4、觸可塑性的影響:采用電生理基礎(chǔ)傳遞、長時(shí)程抑制(LTD)和長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)方法,考察不同刺激頻率對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響。
2.皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響:應(yīng)用皮質(zhì)酮模擬動物體內(nèi)的應(yīng)激狀態(tài),采用電生理基礎(chǔ)傳遞、長時(shí)程抑制(LTD)、長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)和雙脈沖易化(paired pulse facilitation,PPF)的方法,考察皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的影響。
5、r> 3.皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性影響的機(jī)制研究:應(yīng)用N-甲基-D門冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受體拮抗劑與NMDA受體激動劑來探討其作用機(jī)制,通過電生理長時(shí)程抑制(LTD)和長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)方法,考察皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路NMDA受體的作用。
4.白藜蘆醇對皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性改變的調(diào)節(jié)作用:應(yīng)用白藜蘆醇,采用電生理長時(shí)程抑制(LTD)
6、和長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)方法,考察白藜蘆醇對皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性改變的調(diào)節(jié)作用。
結(jié)果:
1.不同頻率的刺激對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性具有不同的影響
在給予1Hz900次的刺激后,產(chǎn)生了LTD的現(xiàn)象,且有顯著性差異(P<0.01);在給予100Hz100串的刺激后,產(chǎn)生了LTP的現(xiàn)象,但未見顯著性差異(P>0.05);在給予400Hz100串的刺激后,產(chǎn)生了LTP的現(xiàn)象,且有顯著性
7、差異(P<0.01)。
2.皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性具有損傷作用
皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路基礎(chǔ)傳遞無明顯影響,且未見顯著性差異(P>0.05);皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路PPF無明顯影響,且未見顯著性差異(P>0.05);皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路LTD具有明顯影響,且有顯著性差異(P<0.01);皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路LTP具有明顯影響,且有顯著性差異(P<0.01);
8、 3.皮質(zhì)酮對小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷作用與NMDA受體有關(guān)
NMDA受體拮抗劑(PEAQX、TCN-201、Ifen和Ro25-6981)對小鼠海馬PP-DG通路LTD具有明顯影響,且有顯著性差異(P<0.01);NMDA受體拮抗劑(D-AP5)對小鼠海馬PP-DG通路LTD無明顯影響,且未見顯著性差異(P>0.05);NMDA受體拮抗劑(D-AP5、PEAQX、TCN-201和Ro25-6981)對小鼠海馬
9、PP-DG通路LTP具有明顯影響,且有顯著性差異(P<0.01);NMDA受體拮抗劑(Ifen)對小鼠海馬PP-DG通路LTP無明顯影響,且未見顯著性差異(P>0.05);NMDA受體激動劑(D-Serine)能夠改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷,且有顯著性差異(P<0.01)。
4.白藜蘆醇能夠改善皮質(zhì)酮過程中小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷作用
單次灌胃白藜蘆醇未能改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP
10、-DG通路LTP損傷,且未見顯著性差異(P>0.05);單次腹腔注射白藜蘆醇未能改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路LTP損傷,且未見顯著性差異(P>0.05);連續(xù)7天灌胃白藜蘆醇能夠改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路LTP損傷,且有顯著性差異(P<0.01);單次側(cè)腦室注射白藜蘆醇能夠改善皮質(zhì)酮致小鼠海馬PP-DG通路突觸可塑性的損傷,且有顯著性差異(P<0.01)。
結(jié)論:
1.不同頻率的刺激對小鼠海馬PP-DG
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