間歇性斷食對腸道菌群及宿主代謝的影響.pdf

1、目的:
　　1.研究間歇性斷食對老年前期肥胖大鼠代謝及腸道菌群的影響。
　　2.研究不同斷食形式對人體腸道菌群的影響。
　　3.研究飲水斷食對人體代謝的影響。
　　方法:
　　1.雌性Wistar大鼠經(jīng)42w高脂高糖飼料飼養(yǎng)造模，根據(jù)體質(zhì)量（(x)±SD）選取模型鼠進行間歇性斷食干預(yù)。干預(yù)方法為每2w斷食72h，總干預(yù)時間18w。干預(yù)后進行口服葡萄糖耐量試驗、血脂四項檢測。收集糞便，通過Illumina高通

2、量測序檢測16S rRNA基因V4可變區(qū)，運用BIPES、QIIME及LEfSe分析腸道菌群。
　　2.招募健康志愿者進行持續(xù)7日的斷食實驗，分為飲水斷食組和果汁斷食組。收集斷食前兩周至斷食后四周的糞便樣本，通過Illumina高通量測序檢測16S rRNA基因V4可變區(qū)，運用BIPES、QIIME及LEfSe分析腸道菌群。
　　3.收集飲水斷食組志愿者在斷食前后的血液標本，進行生理生化指標檢測以及預(yù)處理后進行核磁共振分析樣

3、本中的代謝產(chǎn)物。使用MestReNova對1H CPMG譜進行分析，Simca-P進行多元統(tǒng)計分析。根據(jù)人類代謝產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫對斷食前后有統(tǒng)計差異的代謝產(chǎn)物成分進行鑒定。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠實驗中間歇性斷食組體質(zhì)量相對于模型對照組顯著下降(P＜0.01);高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇均顯著下降(P＜0.05);空腹血糖顯著上升(P＜0.01);葡萄糖耐量測試曲線下面積顯著高于模型對照組，糖耐量減退(P＜0.05)

4、;HE染色顯示間歇性斷食輕度減少肝臟脂肪變性。腸道菌群結(jié)果顯示，斷食組腸道菌群得到顯著改善，具體表現(xiàn)為YS2、RF32、Helicobacteraceae（螺桿菌科）增加，Lactobacillus（乳桿菌屬）、Roseburia（羅氏菌屬）、Erysipelotrichaceae（韋榮球菌科）、Ralstonia（青枯菌屬）、Bradyrhizobiaceae（慢生根瘤菌科）和RF39減少。Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)Bradyrh

5、izobiaceae與總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇呈正相關(guān);RF39與大鼠體質(zhì)量呈正相關(guān)。
　　2.飲水斷食比果汁斷食對人腸道菌群的影響更為強烈，且效果在宿主恢復(fù)飲食后能長久維持。但飲水斷食的效果具有個體差異，總的來看飲水斷食能使腸道菌群變成以Prevotella（普雷沃氏菌屬）、Bacteroides（擬桿菌屬）、Faecalibacterium（柔嫩菌屬）和Succinivibrio（琥珀酸弧菌屬）為主。
　　3.飲水斷

6、食前后的代謝產(chǎn)物水平存在明顯差異，斷食期間3-羥基丁酸酯和乙酰乙酸的表達上升(P＜0.05)，而丙氨酸、谷氨酸鹽、組氨酸、氧化三甲胺、β-葡萄糖、α-葡萄糖的表達顯著下降(P＜0.05)。斷食期間，機體的血糖、胰島素、甘油三酯下降，酮體、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、血肌酐、血尿酸、皮質(zhì)醇升高，提示機體可能通過促進代謝脂肪酸、肌肉、核酸等物質(zhì)產(chǎn)生能量。機體代謝改變可能與脂肪酸合成、鳥氨酸循環(huán)、氨基酸代謝、丙氨酸循環(huán)、轉(zhuǎn)錄翻譯、酮體代謝、

7、三羧酸循環(huán)、糖異生、糖酵解等多個通路相關(guān)。在恢復(fù)飲食3天后代謝產(chǎn)物水平恢復(fù)至與斷食前相似。
　　結(jié)論:
　　1.間歇性斷食能改善腸道菌群，降低老年前期肥胖大鼠體質(zhì)量和血脂水平，但對糖代謝可能有不良影響。
　　2.無卡路里攝入比限制卡路里攝入的斷食方式對腸道菌群影響更大。
　　3.飲水斷食能把擬桿菌為主的腸道菌群變?yōu)橐云绽孜质暇鸀橹?，而對普雷沃氏菌為主的腸道菌群結(jié)構(gòu)影響不大。
　　4.機體在飲水斷食期間可能通