MEIS1、BTBD9在中國(guó)北方漢族人群不安腿綜合征的表達(dá)及相關(guān)臨床研究.pdf

1、[研究背景]
　　不安腿綜合征(Restless legs Syndrome，RLS)是一種常見(jiàn)的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙性疾病，主要表現(xiàn)為夜間睡眠或靜止時(shí)出現(xiàn)的雙下肢的酸、麻痛灼熱、蟲(chóng)爬樣、瘙癢樣等多種異常感覺(jué)，患者被迫捶打、活動(dòng)肢體或下床行走以減輕這種痛苦，嚴(yán)重影響患者的睡眠及生活質(zhì)量。
　　目前為止，關(guān)于RLS的發(fā)病機(jī)制仍不清楚。研究認(rèn)為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)多巴胺能神經(jīng)元功能失調(diào)是其主要的發(fā)病機(jī)制。同時(shí)，鐵、阿片類(lèi)及γ-氨基丁酸(GAB

2、A)等神經(jīng)遞質(zhì)也參與其發(fā)病。研究發(fā)現(xiàn)RLS患者家族陽(yáng)性率高，在雙生子的研究中更明顯，提示RLS存在遺傳易感性，易感基因、環(huán)境因素及其相互作用都參與其發(fā)病。目前為止，在不同人群中通過(guò)全基因組關(guān)聯(lián)性研究，發(fā)現(xiàn)有與其發(fā)病相關(guān)6個(gè)易感基因(MEIS1，BTBD9，PTPRD，MAP2K5，LBXCOR1/SKOR1，TOX3)，其中MEIS1及BTBD9在RLS發(fā)病機(jī)制中的作用在動(dòng)物模型中已有闡述。
　　目前雖沒(méi)有關(guān)于RLS致死、致殘的報(bào)

3、道，但其會(huì)對(duì)患者正常生理功能造成嚴(yán)重影響，研究認(rèn)為其與貧血、腎衰竭、高血壓、冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病、腦血管病等都有相關(guān)性。但目前對(duì)于有關(guān)RLS嚴(yán)重程度的影響因素的研究并不多。
　　[研究目的]
　　1.研究易感基因MEIS1 rs2300478、BTBD9 rs3923809 SNP位點(diǎn)與中國(guó)北方漢族人群散發(fā)性RLS的相關(guān)性，促進(jìn)對(duì)其發(fā)病機(jī)制的理解;
　　2.探討疾病的發(fā)病年齡、疾病的持續(xù)時(shí)間及血清紅細(xì)胞、血紅蛋白、血清

4、鐵、鐵蛋白的水平與RLS嚴(yán)重程度的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)影響RLS嚴(yán)重程度的有關(guān)因素。
　　[研究?jī)?nèi)容]
　　1.易感基因MEIS1 rs2300478及BTBD9 rs3923809基因型及等位基因頻率在中國(guó)漢族人群散發(fā)性RLS中分布是否具有顯著性差異;
　　2.研究RLS的發(fā)病年齡、持續(xù)時(shí)間及血清紅細(xì)胞、血紅蛋白、血清鐵、鐵蛋白的水平與RLS嚴(yán)重程度的相關(guān)性。
　　[研究方法]
　　1.收集RLS患者血液標(biāo)本，所

5、有病例均來(lái)源于2016.4-2016.12山東大學(xué)第二醫(yī)院門(mén)診及神經(jīng)內(nèi)科病房。入選標(biāo)準(zhǔn):所有患者均符合1995年國(guó)際不安腿綜合征研究組(IRLSSG)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)及2012年最新修訂版。所有入選患者均簽署知情同意書(shū)。根據(jù)不安腿綜合征嚴(yán)重程度調(diào)查問(wèn)卷(IRLSSGRS)進(jìn)行嚴(yán)重程度評(píng)分。
　　2.對(duì)照組:均來(lái)源于山東大學(xué)第二醫(yī)院健康查體中心的健康成年人。入選標(biāo)準(zhǔn):
　?、贌o(wú)貧血、肝腎功能不全、高血糖、高血壓病、甲狀腺功能減低

6、、偏頭痛、關(guān)節(jié)炎、周?chē)窠?jīng)病等慢性疾病;
　?、跓o(wú)妊娠或在哺乳期;
　?、圩罱?4d無(wú)多巴胺能或抗多巴胺能藥物、擬交感藥物、抗抑郁藥、鎮(zhèn)靜藥、催眠藥、抗癲癇藥、苯二氮卓類(lèi)藥物、可樂(lè)定、葉酸、鎂劑、亞鐵鹽、鋰劑、抗組胺藥、胃復(fù)安等藥物服用史;
　?、軣o(wú)抑郁焦慮、運(yùn)動(dòng)障礙性疾病、精神障礙等疾病。
　　3.收集所有研究對(duì)象外周血2-3ml，EDTA抗凝處理，提取全血基因組DNA，TaqMan探針檢測(cè)BTBD9 rs39

7、23809、MEIS1 rs2300478基因型。
　　4.利用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±S)，計(jì)數(shù)資料以率(％)表示。在對(duì)照組及RLS組中行多態(tài)位點(diǎn)Hardy-weinberg平衡檢驗(yàn)。在對(duì)照組及RLS組中計(jì)算基因型、等位基因頻率，利用X2比較兩組間的差異，同時(shí)計(jì)算優(yōu)勢(shì)比及95％置信區(qū)間評(píng)估不同基因型效應(yīng)。用單因素方差分析比較與RLS嚴(yán)重程度相關(guān)的因素。P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

8、>　　[研究結(jié)果]
　　1.RLS病例組97例，其中男性51位，女性53位，平均年齡60.31±12.81歲;對(duì)照組112例，其中男性51例，女性61例，平均年齡57.36±10.3歲，兩組在年齡、性別構(gòu)成比上無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　2.對(duì)所有入選RLS患者，根據(jù)不安腿綜合征嚴(yán)重程度調(diào)查問(wèn)卷(IRLSSGRS)進(jìn)行嚴(yán)重程度評(píng)分，其中輕度21例，中度55例，中重度21例，重度0例;
　　3.MEIS1 rs2300478

9、的3種基因型GG、GT、TT頻率及等位基因(G)頻率在健康對(duì)照組與RLS組的分布無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　4.BTBD9 rs3923809的3種基因型AA、AG、GG頻率及等位基因(A)頻率在健康對(duì)照組與RLS組的分布無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;
　　5.RLS患者發(fā)病年齡、疾病嚴(yán)重程度在MEIS1 rs2300478與BTBD9 rs3923809基因型間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　6.血紅細(xì)胞、血紅蛋白、血清鐵、鐵蛋白的水平與

10、RLS的嚴(yán)重程度間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　7.RLS的嚴(yán)重程度在發(fā)病年齡分布上無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而在疾病持續(xù)的時(shí)間分布上有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　[研究結(jié)論]
　　1.易感基因MEIS1 rs2300478與BTBD9 rs3923809與中國(guó)北方漢族人群散發(fā)性RLS無(wú)相關(guān)性，提示MEIS1 rs2300478與BTBD9 rs3923809不是中國(guó)北方漢族人群散發(fā)性RLS的易感基因;
　　2.MEIS1 rs230