中國北方漢族人群MME基因rs6665與遲發(fā)型阿爾茨海默病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：本研究旨在探索與β淀粉樣蛋白（Aβ）降解密切相關(guān)的腦啡肽酶(NEP)基因(MME)的 miRNAs-187特異性靶向關(guān)聯(lián)序列中的一個單核苷酸多態(tài)性位點（SNPs） rs6665與遲發(fā)型阿爾茨海默?。↙OAD）在中國北方漢族人群發(fā)病的具體關(guān)聯(lián)。
　　方法：通過大樣本病例對照研究，從包括青島大學(xué)附屬青島市立醫(yī)院在內(nèi)的山東省內(nèi)多家三級公立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科選取992例LOAD患者作為病例組，其中檢測信息缺失8例，共納入合格樣本984例，

2、從青島大學(xué)附屬青島市立醫(yī)院查體中心選取1358健康正常人作為對照組，其中信息缺失4例，實際納入了1354例，提取所有受試者外周血 DNA。通過生物信息學(xué)方法從多個公開的生物學(xué)信息庫中在目前已報道的所有在AD腦內(nèi)差異表達的3’UTR miRNAs的靶基因中篩選出在中國北方漢族人群中常見的AD易感基因MME，并最終確定了3’UTR miRNAs-187的特異性靶向序列中的一個常見的單核苷酸多態(tài)位點rs6665。并利用SNP scanTM多重

3、SNP分型技術(shù)獲取各個 SNP位點的基因型。此外，我們還應(yīng)用等位基因特異性多重 PCR（Multi-ARMS）技術(shù)進行了APOE基因分型。最后應(yīng)用SPSS19.0軟件，采取t檢驗、卡方檢驗及Logistic回歸分析等方法對相關(guān)數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，得到相關(guān)統(tǒng)計學(xué)檢驗值：P值，OR值及其95%可信區(qū)間等，進而判斷此SNP位點與漢族人群LOAD發(fā)病的可能關(guān)系。
　　結(jié)果： MME基因的SNP位點rs6665基因型分析結(jié)果顯示等位基因“C

4、”為其最小頻率等位基因。通過卡方檢驗，我們發(fā)現(xiàn)LOAD組和對照組之間的rs6665基因型（P=0.003）和等位基因A/C（P=0.001）的分布差異有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義，其中等位基因頻率分布的比值比OR=1.255,95％置信區(qū)間95％CI=1.102-1.429。此外，通過對兩組人群進行APOEε4攜帶狀態(tài)分層以及卡方檢驗分析發(fā)現(xiàn)：在兩種狀態(tài)APOEε4（+）和APOEε4（-）中，兩組間MME SNP rs6665的基因型分布均依然

5、存在較顯著統(tǒng)計學(xué)差異：APOEε4（+）P＝0.014； APOEε4（-） P＝0.013。而兩組等位基因分布差異則無統(tǒng)計學(xué)意義：APOEε4（+） P＝0.597, APOEε4（-） P＝0.549。通過進一步調(diào)整年齡，性別和APOEε4狀態(tài)等因素后的Logistic回歸分析，我們最終在三種基因型模型中均證實了兩組間MME基因的SNP rs6665的最小頻率等位基因“C”分布存在顯著統(tǒng)計學(xué)差異。并且均呈現(xiàn)除了增加LOAD的發(fā)病風(fēng)險

6、的結(jié)論屬性：顯性模型：P=0.003，OR=1.291,95％CI=1.092-1.526；隱性模型：P=0.030，OR=1.425,95％CI=1.035-1.961；疊加模型：P=0.001，OR=1.249,95％CI=1.093-1.427。此外,通過經(jīng)年齡、性別、基因型等因素調(diào)整后的Logistic回歸分析，我們還在顯性模型中發(fā)現(xiàn)了MME基因的SNP位點 rs6665的最小頻率等位基因“C”與APOEε4等位基因在 LOAD

7、發(fā)病影響中存在顯著交互作用：P=0.035, OR=1.569,95%CI=1.031-2.386。通過對顯性模型進行APOEε4狀態(tài)（APOEε4+/ APOEε4-）分層后，我們在APOEε4+組中發(fā)現(xiàn)了SNP位點rs6665的最小頻率等位基因“C”依然與LOAD的發(fā)病的存在顯著統(tǒng)計學(xué)關(guān)聯(lián)：P=0.002，OR=1.846,95％CI=1.264-2.697。
　　結(jié)論：我們的研究首次在中國北方漢族人群中證實了 MME基因中3