補腎活血方對膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛及致痛因子表達的影響.pdf

1、目的:
　　1、通過臨床試驗觀察補腎強筋膠囊治療肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎的有效性，為補腎活血方應(yīng)用于膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛管理提供臨床依據(jù)。2、通過分子實驗、討補腎強筋膠囊對膝骨關(guān)節(jié)炎患者靜脈血液、膝關(guān)節(jié)滑液致痛因子PGE2、NGF水平以及對滑膜組織、軟骨組織PGE2、NGF基因表達的影響，通過細胞實驗探討補腎強筋膠囊對膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜細胞、軟骨細胞致痛因子PGE2、NGF和相關(guān)細胞因子基因表達的影響，探討補腎強筋膠囊治療肝腎不足，筋

2、脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛的作用機理。
　　方法:
　　1、臨床研究部分
　　選取2016年1月-2016年12月在廣東省第二中醫(yī)院骨科門診就診的患者，進行隨機對照試驗，納入符合選擇標準的90例肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎患者，隨機分為試驗組45例和對照組45例，試驗組予口服補腎強筋膠囊，對照組予口服塞來昔布膠囊，并且均在服藥基礎(chǔ)上指導(dǎo)患者進行股四頭肌肌力訓(xùn)練。兩組療程均為4周，記錄兩組患者治療前，治療1周、2周、4周的

3、的VAS評分、WOMAC評分，記錄兩組患者治療前、治療1月的Lequesne指數(shù)，在服藥4周后進行中醫(yī)證候療效評價，并記錄試驗過程中發(fā)生的不良事件，通過統(tǒng)計學(xué)分析，對補腎強筋膠囊治療肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎的有效性和不良事件發(fā)生情況進行綜合評價。
　　2、實驗研究部分
　　納入符合選擇標準的40例擬行全膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)治療的膝骨關(guān)節(jié)炎患者，分為試驗組20例和對照組20例，術(shù)前1周開始試驗組給予補腎強筋膠囊口服，對照組不予

4、服用藥物。術(shù)前收集患者靜脈血液，術(shù)中膝關(guān)節(jié)滑液、病變滑膜組織、股骨髁軟骨組織。靜脈血液離心處理收集血清，然后進行ELISA法檢測PGE2、NGF水平，膝關(guān)節(jié)滑液進行ELISA法檢測PGE2、NGF水平;病變滑膜組織、股骨髁軟骨組織均分為兩份，一份用于直接進行RT-qPCR檢測PGE2、NGF基因表達，另一份用于進行原代細胞培養(yǎng)，用制備的補腎強筋膠囊含藥血清干預(yù)后，進行RT-qPCR檢測PGE2、NGF、COX-2、MMP13基因表達，通

5、過統(tǒng)計學(xué)分析，探討補腎強筋膠囊對膝骨關(guān)節(jié)炎PGE2、NGF等細胞因子的影響。
　　結(jié)果:
　　1、臨床研究部分
　　中醫(yī)證候療效:試驗組與對照組總有效率均為93.33％，試驗組中醫(yī)證候療效顯著優(yōu)于對照組(P＜0.05)。
　　VAS評分:組間比較，兩組治療前VAS評分無顯著性差異(P＞0.05);與對照組比較，試驗組治療1周、治療2周VAS評分有顯著性差異(P＜0.05);組內(nèi)比較，試驗組和對照組不同治療時間之間

6、VAS評分均有顯著性差異(P＜0.05)，兩組治療1周與治療前比較、治療2周與治療1周比較、治療1月與治療2周比較VAS評分均有顯著性差異(P＜0.05)。治療2周以內(nèi)試驗組在改善VAS評分方面劣于對照組。
　　WOMAC評分:組間比較，兩組治療前WOMAC疼痛評分、僵硬評分、關(guān)節(jié)功能評分以及總評分均無顯著性差異(P＞0.05);WOMAC疼痛評分方面，與對照組比較，治療1周、治療2周、治療1月WOMAC疼痛評分有顯著性差異(P＜

7、0.05)，試驗組在改善WOMAC疼痛評分方面劣于對照組;WOMAC僵硬評分方面，兩組WOMAC不同時間疼痛評分均無顯著性差異（P＞0.05）;WOMAC關(guān)節(jié)功能評分方面，與對照組比較，試驗組治療2周、治療1月WOMAC關(guān)節(jié)功能評分有顯著性差異（P＜0.05），治療2周后試驗組在改善WOMAC關(guān)節(jié)功能評分方面優(yōu)于對照組;WOMAC總評分方面，與對照組比較，試驗組治療1周WOMAC總評分有顯著性差異（P＜0.05）。組內(nèi)比較，兩組治療1周

8、與治療前比較、治療2周與治療1周比較、治療1月與治療2周比較WOMAC疼痛評分、僵硬評分、關(guān)節(jié)功能評分以及總評分均有顯著性差異(P＜0.05)。
　　Lequesne指數(shù):組內(nèi)比較，治療1療程試驗組與對照組Lequesne指數(shù)均顯著改善（P＜0.05）;組間比較，兩組治療前和治療1療程Lequesne指數(shù)差值無顯著性差異（P＞0.05）。
　　不良事件:治療期間，試驗組出現(xiàn)胃腸不適癥狀1例，對照組出現(xiàn)胃腸道不適3例，兩組不良

9、事件發(fā)生率分別為1/50和3/50。
　　2、實驗研究部分
　　血清ELISA檢測，與對照組比較，試驗組能顯著降低血清PGE2、NGF水平(P＜0.05)。
　　膝關(guān)節(jié)滑液ELISA檢測，試驗組與對照組膝關(guān)節(jié)滑液PGE2、NGF水平無顯著性差異（P＞0.05）。
　　患膝關(guān)節(jié)滑膜組織RT-qPCR檢測，與對照組相比，試驗組能顯著降低滑膜組織PGE2、NGF基因表達(P＜0.05)。
　　患膝關(guān)節(jié)軟骨組織RT

10、-qPCR檢測，試驗組與對照組軟骨組織PGE2、NGF基因表達無顯著性差異(P＞0.05)。
　　滑膜細胞RT-qPCR檢測，與KOA組比較，正常組、補腎強筋組組PGE2、NGF、COX-2、MMP-13基因表達均有顯著性差異(P＜0.05);與正常組比較，補腎強筋組PGE2、NGF、COX-2、MMP-13基因表達均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　軟骨細胞RT-qPCR檢測，與KOA組比較，補腎強筋組PGE2、COX-

11、2、MMP-13基因表達均有顯著性差異(P＜0.05);與正常組比較，補腎強筋組PGE2、COX-2、MMP-13基因表達有顯著性差異（P＜0.05）。正常組、KOA組和補腎強筋組之間NGF基因表達無顯著性差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、臨床研究部分
　　補腎強筋膠囊能明顯緩解肝腎不足，筋脈瘀滯型膝骨關(guān)節(jié)炎患者的疼痛評分，而且從服藥1周起即開始發(fā)揮療效，但其止痛效果弱于塞來昔布膠囊，能明顯改善患者關(guān)節(jié)僵硬（

12、WOMAC僵硬評分）及關(guān)節(jié)炎嚴重程度（Lequesne指數(shù)），其效果與塞來昔布膠囊相當，并能改善關(guān)節(jié)活動功能（WOMAC關(guān)節(jié)功能評分），其效果優(yōu)于塞來昔布膠囊。而在中醫(yī)療效方面，補腎強筋膠囊與塞來昔布膠囊總有效率相同，均為93.33％，但補腎強筋膠囊的中醫(yī)證候療效更佳。兩藥在一療程服藥中不良事件發(fā)生率均較低。
　　2、實驗研究部分
　　服用補腎強筋膠囊1周，即能有效降低患者血液中PGE2、NGF水平，降低滑膜組織PGE2、N

13、GF基因表達，但不能降低膝關(guān)節(jié)滑液PGE2、NGF水平，不能下調(diào)軟骨組織PGE2、NGF基因表達。治療早期補腎強筋膠囊緩解膝骨關(guān)節(jié)炎疼痛的作用可能與調(diào)節(jié)血液和滑膜組織P致痛因子GE2、NGF表達相關(guān)。
　　運用補腎強筋含藥血清干預(yù)膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜細胞和軟骨細胞，能顯著下調(diào)滑膜細胞PGE2、NGF、COX-2、MMP13基因表達，下調(diào)軟骨細胞PGE2、COX-2、MMP13基因表達。但無論給予何種干預(yù)，軟骨細胞NGF基因表達均無明顯改