黑胡椒中霉菌拮抗菌的篩選及其抑制作用研究.pdf

1、黑胡椒中霉菌} 士抗菌的篩選及其抑制作用研究摘要黑胡椒是世界上最古老和最著名的香辛料之一，被譽為“香料之王”，具有極高的食用和藥用價值。如今廣泛分布于熱帶地區(qū)，在這些種植區(qū)域，高溫高濕的氣候十分利于真菌生長和真菌毒素產(chǎn)生，給黑胡椒的品質(zhì)和食用安全性帶來威脅。生防菌在食品防腐和糧食儲藏中已經(jīng)有了廣泛的應(yīng)用。本研究以乳酸菌發(fā)酵制品和香辛料為原料，從中分離、篩選、鑒定出對黃曲霉生長有較強抑制能力的細菌，并對其培養(yǎng)條件優(yōu)化、拮抗特性及在黑胡椒中

2、的應(yīng)用進行了初步研究。主要研究結(jié)果如下：( 1 ) 從樣品中分離至1 J 2 2 3 株細菌，經(jīng)過初篩，對黃曲霉( A s p e r g i l l u s [ 1 a v u s ) 有較強抑制作用的菌株3 1 株，其中9 株產(chǎn)芽孢桿菌分離自香辛料表面，另# b 2 2 株主要來自泡菜母水和香腸中的乳酸菌。但隨著培養(yǎng)時間的延長，乳酸菌的抑霉性減弱，最終從9 株芽孢桿菌中篩選到一株對黃曲霉抑制能力達5 8 ．8 ％的菌株F 1 ，且分

3、離來源為黑胡椒，經(jīng)生理生化鑒定和1 6 S r D N A 序列分析結(jié)果顯示菌株F l 為解淀粉芽孢桿菌( B a c i l l u s a m y l o l i q u e f a c i e n s ) 。( 2 ) 對B ．a(chǎn) m y l o l i q u e f a c i e n sF 1 的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基成分進行了優(yōu)化，優(yōu)化后B ．a(chǎn) m y l o l i q u e f a c i e n sF 1 發(fā)酵上清液對

4、黑胡椒中黃曲霉的抑制作用提高了6 0 ％，對黑胡椒中其他霉菌黑曲霉、白曲霉和寄生曲霉的抑制作用達到6 2 ．8 ％、6 6 ．3 ％, 1 1 1 4 ．3 ％，說明F 1 具有廣譜抑菌性。上清液過超濾膜分離濃縮后進行抑菌試驗證明抑菌物質(zhì)為大分子物質(zhì)，分子量在3 0k u ．1 0 0k u 。超濾液能耐受一定的高溫，在p H 為5 ．0 ．6 ．0 的范圍內(nèi)活性最高，經(jīng)胰蛋白酶消化后抑菌率降低7 0 ％，說明抗菌物質(zhì)為蛋白質(zhì)。( 3

5、) 對B ．a(chǎn) m y l o l i q u e f a c i e n s F 1 抗菌超濾液對黃曲霉生長、產(chǎn)毒的影響及其在黑胡椒中的應(yīng)用進行研究。從培養(yǎng)得到的菌絲質(zhì)量干重可得出，超濾液抑制孢子萌發(fā)、延緩菌絲發(fā)育。發(fā)酵液H P L C 檢鋇, U A F B l 濃度，結(jié)果顯示超濾液中所含粗蛋白也能夠抑制黃曲霉真菌毒素的產(chǎn)生。將超濾液應(yīng)用到黑胡椒儲藏中抵抗黃曲霉的侵染，檢測儲藏后黑胡椒的霉菌含量、干物質(zhì)、胡椒堿、胡椒精油和揮發(fā)性成分

6、變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)霉菌的代謝活動造成黑胡椒質(zhì)量減輕，部分營養(yǎng)物質(zhì)被分解的同時，胡椒堿和胡椒精油更容易被萃取出來，但揮發(fā)性成分發(fā)生顯著變化從而導(dǎo)致黑胡椒風(fēng)味改變。試驗證明超濾液中的抗菌物質(zhì)能夠在一定程度上抑制黃曲霉對黑胡椒組織的分解和其他品質(zhì)的不良影響，具有潛在的應(yīng)用價值。關(guān)鍵詞：黑胡椒，解淀粉芽孢桿菌，抗菌物質(zhì)，應(yīng)用黑胡椒中霉菌拈抗菌的篩選及其抑制作用研究o f h y p h a e ．T h e d e t e c t i o nr e

7、 s u l t so f A F B 1 c o n c e n t r a t i o n i nf e r m e n t a t i o nl i q u i db yH P L C m e t h o ds h o w e d t h a t t h ec r u d ep r o t e i nc o n t a i n e di nu l t r a f i l t r a t ea n t i f u n g a lu

8、l t r a f i l t r a t e c o u l da l s or e d u c eg e n e r a t i o no f a f l a t o x i n ．T h eu l t r a f i l t r a t ew a sa p p l i e d t o p r e v e n tt h eA s p e r g i l l u si n f e c t i o no nB P s t o r a g

9、 e ．A c c o r d i n gt ot h ec h a n g e s o f m o u l d a c c o u n t s ，d r ym a t t e r ，p i p e r i n e ，e s s e n t i a l o i la n dv o l a t i l ec o m p o u n d s w e c o u l dc o n c l u d t h a tm o u l d m e t

10、a b o l i s mc o u l d l e a dt Ot h ee a s eo f d r y m a t t e rP i p e r i n ea n d e s s e n t i a lo i lw e r em o r e e a s i l ye x t r a c t e dw h i l e t h en u t r i e n t so f B P w e r eb r o k e nd o w nb y

11、m o u l d ．H o w e v e r ，t h ev o l a t i l ec o m p o u n d sw e r es i g n i f i c a n t l yc h a n g e dV v ’h i c hb r o u g h ta b o u tf l a v o u rc h a n g e so fB P ．O u r r e s e a r c hd e m o n s t r a t e d

12、t h a tt h ea n t i f u n g a ls u b s t a n c e si nu l t r a f i l t r a t ec o u l d r e s i s t t h e d e c o m p o s R i o n o f B Po r g a n i z a t i o n a n d s l a c k o t h e r h a r m f u l e f f e c t s ．T h

13、eB ．a(chǎn) m y l o l i q u e f a c i e n sF 1 h a s p o t e n t i a la p p l i c a t i o n v a l u e ．K e y w o r d s ：b l a c k p e p p e r ，B a c i l l u sa m y l o l i q u e f a c i e n s ，a n t i f u n g a ls u b s t a n