2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:分析肺癌病人外周血中CD19+CD20-B細胞表型特點,為其免疫抑制功能提供理論依據(jù)。通過肺癌細胞上清誘導(dǎo)B細胞,檢測對T細胞增殖的抑制效應(yīng),驗證肺癌中抑制性B細胞的存在。
  內(nèi)容和方法:收集26例肺癌初治患者及11例健康人外周血,所有患者均經(jīng)術(shù)后病理證實為肺癌。用流式細胞術(shù)檢測肺癌患者和健康人外周血中CD19+B細胞及其亞群 CD19+CD20-B細胞比例,并比較患者和健康人之間的差異。分析26例肺癌患者外周血 B細胞中

2、 CD19+CD20-B細胞的比例,結(jié)合臨床病理資料分析CD19+CD20-B細胞比例和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及肺癌分期等臨床指標(biāo)的關(guān)系。通過多色流式分析的方法檢測肺癌患者外周血 CD19+B細胞中 CD19+CD20-及CD19+CD20+B細胞亞群的表型分子特點,分析抑制性分子 PD-1、CTLA-4和Tim-1在兩群細胞上的不同表達水平。分析兩者之間 CD62L、CCR6、CD27、C24以及CD38表達的差異;收集肺癌組織及癌旁組

3、織標(biāo)本,檢測并比較癌和癌旁組織浸潤淋巴細胞的密度。將分選的外周血B細胞分別在加入刺激因子TNF家族B細胞活化因子(B cell-activating factor belonging to the TNF family,BAFF)的培養(yǎng)液及加入腫瘤細胞系 NCI-H1299、NCI-520培養(yǎng)上清的培養(yǎng)液中進行培養(yǎng),比較三種方案培養(yǎng)后B細胞表型分子的變化,同時比較不同上清刺激后的B細胞對CD4+及CD8+T細胞增殖抑制程度的差異。

4、>  結(jié)果:流式分析結(jié)果顯示,與健康人相比,肺癌患者外周血中CD19+B細胞比例顯著下降( p=0.0013)。CD19+CD20-B細胞在肺癌患者比例高于健康人(p=0.0379)。進一步將肺癌患者分成轉(zhuǎn)移組(包括淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移)和非轉(zhuǎn)移組,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移組CD19+CD20-B細胞顯著高于非轉(zhuǎn)移組(p=0.0341),但是未能發(fā)現(xiàn)CD19+CD20-B細胞比例與肺癌患者的其他臨床病理特征(性別、年齡、腫瘤大小、臨床分期等)有關(guān)。多色

5、流式分析結(jié)果顯示在人外周血CD19+B細胞亞群中,與CD19+CD20+B細胞相比,CD19+CD20-B細胞中高表達抑制性分子PD-1(p<0.0001)、CTLA-4(p<0.0001)和Tim-1(p<0.0001),說明CD19+D20-B細胞代表一群具有免疫抑制作用的 B細胞亞群;同時低表達 CD62L,說明CD19+CD20-B細胞無法到達脾臟、淋巴結(jié)等次級淋巴器官,接受抗原刺激而發(fā)育成為成熟的漿細胞;而低表達CCR6則說明

6、其不能有效地啟動體液免疫應(yīng)答。CD19+CD20-B細胞較CD19+CD20+B細胞高表達CD38(p<0.0001),高表達CD27(p<0.0001),低表達CD24(p<0.0001),說明肺癌中CD19+CD20-B細胞與免疫相關(guān)性疾病中調(diào)節(jié)性B細胞(regulatory B cell, Breg)有所差異。與癌旁組織相比,癌組織浸潤較多的 CD19+B細胞(p=0.0070)和 CD19+CD20- B細胞(p=0.0120)

7、。功能實驗顯示,與BAFF刺激組相比,肺癌細胞系NCI-H1299上清刺激后的B細胞可以誘導(dǎo)產(chǎn)生一群表型為CD19+CD20-B細胞,而NCI-H520肺癌細胞上清刺激組則未誘導(dǎo)產(chǎn)生該群細胞。將三組B細胞分別與CD3+T細胞進行共培養(yǎng),檢測CD3+T細胞中CD4+及CD8+T細胞的增殖情況,體外實驗結(jié)果顯示,NCI-H1299上清培養(yǎng)后的B細胞對CD4+及CD8+T細胞增殖均具有明顯的抑制效應(yīng)。
  結(jié)論:肺癌病人外周血CD19+

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