隨機(jī)尿游離型甲氧基腎上腺素類物質(zhì)的電化學(xué)檢測新方法及臨床應(yīng)用.pdf

1、目的：
　　1.建立一種簡單、低廉測定隨機(jī)尿游離型甲氧基腎上腺素類物質(zhì)（metanephrines，MNs）的直接電化學(xué)檢測方法。
　　2.用所建立的方法測定嗜鉻細(xì)胞瘤患者和對照組隨機(jī)尿液游離型MNs濃度水平，同時(shí)也用高效液相色譜-電化學(xué)法（high performance liquid chromatography with electrochemical detection，HPLC-ED）檢測所有研究對象血漿游離型MN

2、s，并探討MNs對嗜鉻細(xì)胞瘤診斷效能。
　　方法：
　　1.分別采用循環(huán)伏安法（cyclic voltammetry，CV）和示差脈沖伏安法（differential pulse voltammetry，DPV）對MNs進(jìn)行定性和定量分析。電極為絲網(wǎng)印刷碳電極（screen-printed carbon electrode, SPCE）：工作電極和對電極由碳漿印制，參比電極為Ag/AgCl電極。
　　2.標(biāo)本采用固相萃

3、取技術(shù)對其進(jìn)行預(yù)處理后，加入PBS溶液中混勻，然后取50μL滴加于絲網(wǎng)印刷電極工作區(qū)上，并于連接電化學(xué)工作站用DPV進(jìn)行反應(yīng)信號測定。
　　3.MNs水平與HPLP-ED法測定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　4.用建立方法測定對照組（n=63）和嗜鉻細(xì)胞瘤病人組（n=22）隨機(jī)尿中游離型MNs水平和HPLC-ED法測定血漿游離型MNs濃度，受試者工作曲線（receiver operating characteristic，ROC）

4、用于評價(jià)對嗜鉻細(xì)胞瘤診斷效能。
　　結(jié)果：
　　1.隨機(jī)尿MNs的線性范圍為0.25~12.5 mg/L，回歸方程Y=0.916 X-0.127，相關(guān)系數(shù)r=0.994，最低定量限是0.20 mg/L，最低檢測限為0.05 mg/L。天內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和天間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在5.9%~9.7%和6.8%~9.9%之間。天內(nèi)回收率為82.0%~101.1%，天間回收率為81.0%~96.5%。
　　2.嗜鉻細(xì)胞瘤患者組隨機(jī)

5、尿中游離型MNs水平分別采用建立方法與HPLC-ED法測定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，相關(guān)性良好(r=0.941,p=0.000)。
　　3.本實(shí)驗(yàn)建立的方法檢測隨機(jī)尿游離型MNs和HPLC-ED法檢測血漿中游離型MN和NMN濃度，嗜鉻細(xì)胞瘤患者組較對照組顯著增高（P均＜0.05），當(dāng)血漿游離NMN和MN截?cái)嘀捣謩e為0.540 mg/L和0.128 mg/L，NMN的靈敏度與特異度分別是90.9%、95.2%，曲線下面積是0.975；MN

6、的靈敏度與特異度分別是86.4%、85.7%，曲線下面積是0.916。本實(shí)驗(yàn)建立方法檢測隨機(jī)尿游離型MNs濃度截?cái)嘀等?.404 mg/L時(shí)，靈敏度與特異度分別是95.5%、92.4%，曲線下面積是0.981。
　　結(jié)論：
　　1.免修飾SPCE直接檢測隨機(jī)尿液中游離型MNs成本低廉、速度快。SPCE能進(jìn)行批量生產(chǎn)，在臨床診斷方面具有良好的應(yīng)用前景。2.隨機(jī)尿游離型MNs診斷PHEO靈敏度優(yōu)于血漿游離型NMN和MN?；陔S機(jī)