EGCG對cTnIR193H限制型心肌病小鼠cTnI表達的影響.pdf

1、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）源于茶多酚，具有多種生物活性。EGCG可以降低組蛋白去乙酰化酶（HDACs）的活性，從而調控基因的表達。本課題組前期對cTnI R193H限制型心肌病模型小鼠研究發(fā)現(xiàn)，正常 cTnI表達降低、而突變 cTnI異常表達是限制性心肌?。≧CM）發(fā)病機制之一。研究還發(fā)現(xiàn)，EGCG干預R193H模型小鼠，可以降低模型小鼠心肌細胞對鈣的敏感性，改善其舒張功能。本課題組前期對老年小鼠的研究發(fā)現(xiàn)，老年小鼠存在衰老性

2、舒張功能障礙并同時伴有cTnI表達降低，給予EGCG可明顯升高老年小鼠cTnI的表達，改善其衰老性舒張功能障礙。為此提出科學假設：EGCG還可能通過上調R193H小鼠正常cTnI的表達，參與改善舒張功能障礙。
　　目的：
　　本實驗利用EGCG對cTnI R193H模型小鼠進行3個月干預，以期探尋EGCG升高模型小鼠心臟正常cTnI的表達量，及其組蛋白乙酰化的調控機理。
　　方法：
　　選擇8周齡的健康SPF級C

3、57BL/6小鼠和cTnI R193H雄性小鼠各30只，兩種小鼠均分別分成EGCG干預組、DMSO干預組以及未干預組。EGCG干預采用腹腔注射溶于DMSO的EGCG，按照各個小鼠體重，每1kg體重給予EGCG50mg，DMSO干預采用腹腔注射與EGCG干預組溶劑容積一致的 DMSO，未干預組僅進行腹腔注射行為，但不注射。每周干預5天，干預3個月后收集各組小鼠心臟組織。分別用Western blot、RT-PCR、ChIP-Q-PCR檢測

4、 cTnI的表達量；cTnI、GATA4及HDAC1的 mRNA表達水平；cTnI基因啟動子區(qū)HDAC1、GATA4的結合水平及組蛋白 H3K9乙?；?。
　　結果：
　　R193H小鼠心臟EGCG干預組與DMSO干預組和未干預組比較結果顯示：1. R193H小鼠EGCG干預組正常cTnI的表達量在mRNA及蛋白水平均升高（P＜0.05），而正常的野生型C57小鼠則無此變化。2. R193H小鼠 EGCG干預組 GATA4

5、的mRNA表達水平升高，HDAC1的mRNA表達水平降低（P＜0.05）。3. R193H小鼠EGCG干預組組蛋白H3K9乙?；缴?，cTnI啟動子區(qū)域HDAC1結合水平降低，GATA4的結合水平升高（P＜0.05）。
　　結論：
　　EGCG可通過抑制HDAC1的表達及HDAC1在cTnI啟動子區(qū)域的結合，促進組蛋白H3K9的乙酰化、心臟核心轉錄因子GATA4的表達及 GATA4在 cTnI啟動子區(qū)域的結合，上調限制型