蜂膠中酚酸和酚酸酯對脂代謝紊亂的調(diào)控作用.pdf

1、蜂膠是蜜蜂從自然界的植物組織上采集的天然產(chǎn)物，其含有豐富的多酚類化合物，這些物質(zhì)構(gòu)成其生物活性和藥理功能的多樣性。近年發(fā)現(xiàn)蜂膠具有顯著的抗氧化、抗炎癥、抗微生物、抗腫瘤、抗糖尿病、調(diào)控脂代謝和免疫調(diào)節(jié)等生物活性。目前由于脂代謝紊亂引起的肥胖、糖尿病、心腦血管疾病等引起了人們高調(diào)重視，大量的研究發(fā)現(xiàn)天然產(chǎn)物是控制和預(yù)防疾病的有效藥物來源。以往的實驗表明，蜂膠的提取物和其中一些成分如高良姜素、槲皮素、p-香豆酸和咖啡酸苯乙酯等具有調(diào)控脂肪代

2、謝的生物活性，但鮮有研究進一步報道蜂膠中其他化合物，特別是酚酸和酚酸酯能夠參與調(diào)控，以及化合物的作用機制。因此本文旨在研究中國蜂膠中的主要酚酸和酚酸酯成分對脂代謝紊亂的調(diào)控，明確有效成分和探究相關(guān)作用機制。
　　本文對中國蜂膠中主要的八種酚酸（咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、異阿魏酸、3，4-二甲氧基肉桂酸、肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸和亞桂皮乙酸），八種酚酸酯（咖啡酸苯乙酯、咖啡酸肉桂酯、咖啡酸芐酯、p-香豆酸肉桂酯、p-香豆酸芐酯、阿

3、魏酸芐酯、肉桂酸肉桂酯和4-甲氧基肉桂酸肉桂酯）和3，4-二羥基苯甲醛進行研究。用MTT法檢測了這些成分對人肝細(xì)胞L02和小鼠前脂肪細(xì)胞3T3-L1的細(xì)胞活力影響，確定了藥物治療的作用濃度。先建立L02肝細(xì)胞脂質(zhì)累積模型，用油紅O染色法篩選出蜂膠的酚酸和酚酸酯中降脂效果最佳的成分，然后研究最佳成分對細(xì)胞內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和氧化物酶體增殖物激活受體（PPARs）蛋白表達(dá)的影響;最后建立3T3-L1脂肪細(xì)胞脂肪因子分泌紊亂模型，檢測這17種成分作

4、用后脂肪因子和炎性因子的胞外分泌。
　　本研究發(fā)現(xiàn)蜂膠酚酸中的p-香豆酸和異阿魏酸，芳香醛3，4-二羥基苯甲醛，還有酚酸酯中的p-香豆酸芐酯、p-香豆酸肉桂酯、咖啡酸苯乙酯、咖啡酸芐酯和咖啡酸肉桂酯能夠有效降低游離脂肪酸誘導(dǎo)的L02細(xì)胞的脂質(zhì)累積。其中咖啡酸肉桂酯是唯一一個在四個給藥濃度(5、10、50、100μmol/L)下都具有明顯降脂作用的化合物，且是蜂膠中含量較多，以往的研究也很少關(guān)注的成分。通過蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)檢測L0

5、2細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白和調(diào)控過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARs)蛋白的表達(dá)水平，咖啡酸肉桂酯能夠有效降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中標(biāo)志蛋白CHOP和ATF-6的水平，上調(diào)PPAR-α和下調(diào)PPAR-γ的表達(dá)，改善細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂。
　　多因子檢測試劑盒檢測了蜂膠中17個酚酸類成分對與脂肪細(xì)胞炎癥相關(guān)的七個細(xì)胞因子的表達(dá)，即三個脂肪因子脂聯(lián)素(Adiponectin)、瘦素(Leptin)和抵抗素（Resistin），兩種炎癥因子白細(xì)胞介素-