HPLC對細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚和馬兜鈴酸A含量的測定.pdf

1、目的:用高效液相色譜法(HPLC)對細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚和馬兜鈴酸A(AAⅠ)的含量進(jìn)行測定，旨在為臨床安全有效地使用細(xì)辛和客觀評價細(xì)辛提供實驗依據(jù)，并建立起測定細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚和AAⅠ的含量的HPLC方法。
　　 方法:
　　 1.細(xì)辛含藥血清的制備
　　 將北細(xì)辛根莖置于電熱干燥箱中干燥1h(溫度40℃)，然后經(jīng)球磨粉碎機(jī)研磨粉碎，過5號篩(80目)，即得細(xì)辛散劑，置于陰涼處密封保存?zhèn)溆?。將成年S

2、D大鼠隨機(jī)分成兩組，即空白血清組和含藥血清組。其中細(xì)辛含藥血清組的細(xì)辛用藥劑量為1.78g/kg；空白血清組給予等量的生理鹽水。每天給藥2次，連續(xù)8天。在最后一次給藥2h后對大鼠進(jìn)行眼眶采血。將所采血液在室溫下靜置30min后取上清液，3000rpm離心20min，分離血清，取血清2ml，滴加甲醇8ml，混勻，2500rpm離心10min，取上清液，水浴65℃揮去甲醇，余液濃縮，過0.22μm微孔濾膜濾過除菌，分裝，-20℃條件下保存?zhèn)?/p>

3、用。
　　 2.HPLC對細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚含量的測定
　　 用HPLC法，儀器為戴安高效液相色譜儀：P680型輸液泵、在線脫水機(jī)、手動進(jìn)樣器、TCC-100柱溫箱、PDA-100二極管陣列檢測器、chromel eon色譜工作站。條件：色譜柱為DiamonTM0DS-G18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相為甲醇-水-0.025mol/1磷酸(78∶21∶1)；柱溫為室溫；檢測波長為250nm；流速為1m

4、l/min；進(jìn)樣20μl，測定細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚的含量。
　　 3.HPLC對細(xì)辛含藥血清中AAⅠ含量的測定
　　 用HPLC法，儀器為戴安高效液相色譜儀：P680型輸液泵、在線脫水機(jī)、手動進(jìn)樣器、TCC-100柱溫箱、PDA-100二極管陣列檢測器、chromeleon色譜工作站。條件：色譜柱為DiamonTM0DS-C18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相為甲醇-水-醋酸(72∶27∶1)；柱溫為室溫；

5、檢測波長為390nm；流速為1m1/min；進(jìn)樣20μl，測定細(xì)辛含藥血清中AAⅠ的含量。
　　 結(jié)果:細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚的含量為0.0032mg/m1。細(xì)辛含藥血清中AAⅠ的含量低于檢測限。
　　 結(jié)論:
　　 1.初步開展了HPLC法對細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚和AAⅠ的含量測定；
　　 2.建立了測定細(xì)辛含藥血清中甲基丁香酚和AAⅠ的HPLC方法；
　　 3.細(xì)辛含藥血清中含有一定血藥濃