纖維化標志物、雌激素受體α 及SDF-1-CXCR-4軸在大鼠宮腔粘連模型中的初步研究.pdf

1、目的初步探討纖維化標志物（TGF-β1，MMP-9），雌激素受體α（ERα）以及SDF-1/CXCR-4軸在大鼠宮腔粘連模型上的表達及意義。宮腔粘連的主要特點是宮腔操作等原因使子宮內(nèi)膜嚴重受損后宮腔內(nèi)粘連帶形成，使宮腔失去正常形態(tài)?，F(xiàn)臨床上針對該類患者主要采取宮腔鏡下宮腔粘連分離術(shù)（TCRA術(shù)）聯(lián)合雌激素等輔助手段促進損傷后子宮內(nèi)膜正常修復(fù)。
　　目的：
　　1.初步檢測大鼠宮腔粘連形成過程中纖維化相關(guān)因子的表達，為下一步進

2、行抑制內(nèi)膜過度纖維化的研究奠定一定的基礎(chǔ)。
　　2.在體檢測大鼠宮腔粘連形成過程中ERα的表達情況，有助于指導(dǎo)臨床治療宮腔粘連患者對雌激素劑量的選擇。
　　3.通過動態(tài)檢測SDF-1/CXCR-4軸相關(guān)指標的變化，為骨髓間充值干細胞（BMSCs）治療宮腔粘連的相關(guān)機制研究提供一定的理論。
　　方法：
　　1.于動情期利用95%無水乙醇持續(xù)注射大鼠宮腔5min分別于術(shù)后第1天、第3天、第1個動情期、第2個動情期、第

3、3個動情期、第4個動情期、第5個動情期獲取實驗組及對照組（正常）大鼠子宮內(nèi)膜組織。
　　2.采用組織化學染色方法（HE、Masson、IHC）觀察大鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)變化并檢測子宮內(nèi)膜相關(guān)指標（keratin、Vimentin和 CD34）的表達情況，分別采用逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR（RT-qPCR）、蛋白質(zhì)免疫印跡（Western blot）和免疫組織化學（IHC）檢測宮腔粘連大鼠子宮內(nèi)膜TGF-β1、MMP-9、ERα和SDF-1/C

4、XCR-4的mRNA和蛋白水平表達。
　　結(jié)果：
　　1.成功構(gòu)建宮腔粘連大鼠模型，術(shù)后大鼠子宮內(nèi)膜菲薄、厚度及腺體顯著低于對照組（P＜0.05）；術(shù)后子宮內(nèi)膜上皮細胞標志物keratin、基質(zhì)細胞標志物 Vimentin及微血管密度標志物 CD34表達明顯降低；隨著術(shù)后時間的推移，大鼠子宮內(nèi)膜纖維化組織顯著增生，逐漸替代并覆蓋原有正常子宮內(nèi)膜，直至宮腔粘連形成。
　　2.術(shù)后在大鼠子宮內(nèi)膜修復(fù)過程中，TGF-β1、M

5、MP-9、ERα表達水平顯著高于對照組（P＜0.05）；SDF-1于術(shù)后早期呈現(xiàn)逐漸上升趨勢，并于術(shù)后第二動情期達到頂峰（P＜0.05），但與對照組相比，CXCR-4在術(shù)后五個動情周期以內(nèi)表達無明顯升高（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.臨床上治療宮腔粘連雌激素劑量的選擇需要遵循個體化原則；
　　2.宮腔粘連的形成與發(fā)展可能與內(nèi)膜損傷后TGF-β1、MMP-9表達異常升高有關(guān)，而自身SDF-1趨化的CXCR-4陽性