鹽芥RAV基因家族在擬南芥中的過量表達及功能驗證.pdf

1、鹽芥鹽芥RAV基因家族在基因家族在擬南芥擬南芥中的過量表達及功能驗證表達及功能驗證OverexpressionFunctionalVerificationThellungiellasalsugineaRAVGeneFamilyinTransgenicArabidopsis學(xué)科專業(yè)：遺傳學(xué)研究生：羅翠指導(dǎo)教師：楊少輝副教授天津大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院二零一六年五月摘要RAV（RelatedtoABI3VP1）轉(zhuǎn)錄因子含有AP2結(jié)構(gòu)域和B3結(jié)

2、構(gòu)域，是高等植物體內(nèi)具有多種功能的一類轉(zhuǎn)錄因子。盡管RAV基因家族在棉花、大豆和擬南芥等多種植物中已有一定程度的研究，但對鹽生模式植物鹽芥RAV基因家族的研究尚且沒有。本文分離得到了鹽芥全基因組中的8個TsRAV基因，并根據(jù)生物信息學(xué)分析將其分成兩組（A組，B組），A組成員為TsRAV1TsRAV4，B組成員為TsRAV5TsRAV8。實時定量分析發(fā)現(xiàn)鹽芥種子播種后0d到4d過程中8個TsRAV表達水平一直呈現(xiàn)下降趨勢。通過對鹽芥幼苗進

3、行NaCl和ABA脅迫處理，分別分析根和葉中的TsRAV基因表達水平發(fā)現(xiàn)，ATsRAVs基因中TsRAV2、TsRAV3的表達受到NaCl明顯的抑制，BTsRAVs（TsRAV5TsRAV8）的表達水平極低且對NaCl脅迫不敏感；鹽芥ATsRAVs基因和BTsRAVs基因?qū)BA脅迫的應(yīng)答不同，外源ABA抑制了TsRAV1、2、3基因的表達；而BTsRAVs基因雖然在無ABA脅迫時表達量極低，但是在葉中還是受到ABA短暫的誘導(dǎo)，表達量出

4、現(xiàn)瞬時增長。對35S:TsRAVs轉(zhuǎn)基因擬南芥在NaCl、ABA及干旱脅迫下的應(yīng)答進行分析發(fā)現(xiàn)，隨著NaCl濃度的增加，35S:TsRAVs轉(zhuǎn)基因株系受到的抑制越來越顯著，且在不同鹽濃度下35S:ATsRAVs（35S:TsRAV1TsRAV4）株系發(fā)芽率均低于35S:BTsRAVs（35S:TsRAV5TsRAV8）株系；外源ABA對35S:TsRAVs株系種子萌發(fā)起抑制作用，且35S:ATsRAVs株系受到的抑制程度較35S:BTs

5、RAVs株系更強；野生型（WT）、35S:ATsRAVs及35S:BTsRAVs株系幼苗在根的生長方面受外源ABA的抑制程度無顯著差異；由于35S:ATsRAVs株系在0.5μMABA脅迫環(huán)境中黃子葉較WT和BTsRAVs株系多，推測ATsRAVs基因可能與ABA調(diào)控的光合作用和葉片衰老相關(guān)；35S:ATsRAVs株系在干旱條件下，影響氣孔的關(guān)閉活動，因此推測ATsRAVs（TsRAV1TsRAV4）基因是植物生長發(fā)育過程中的負(fù)調(diào)節(jié)因子