白介素35蛋白在糖尿病視網(wǎng)膜病變中作用的初步研究.pdf

1、目的：白介素35在調(diào)節(jié)T細胞及B細胞免疫應答及炎癥反應中起重要作用，本文將通過測定其在糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清及玻璃體中的表達，以及體外實驗探討白介素35蛋白對人視網(wǎng)膜色素上皮細胞（Acute retinal pigment epithelial cell,ARPE-19）功能的影響，以期探討其與糖尿病視網(wǎng)膜病的關系。
　　方法：選擇在2014年9月至2015年11月期間重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院眼科住院部的2型糖尿病患者，根據(jù)國際

2、標準將其分為糖尿病無視網(wǎng)膜病變組（DWR）、非增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變組（NPDR）及增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變組（PDR），納入特發(fā)性黃斑前膜需行玻璃體切割術患者作為對照組。分別抽取2型糖尿病及患者對照組患者及靜脈血，離心分離出血清；于手術中抽取增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變患者及對照組患者玻璃體液，離心取上清。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗分別測定各血清及玻璃體液中白介素35的蛋白表達水平。將ARPE-19細胞分為低糖組（5.5mmol/L D-葡萄糖）、

3、高滲對照組（5.5mmol/L D-葡萄糖加20mmol/L甘露醇）、高糖組（25mmol/L D-葡萄糖）、高糖+IL-35蛋白組A（25mmol/L D-葡萄糖加重組白介素35蛋白20ng/ml）、高糖+IL-35蛋白組B（25mmol/L D-葡萄糖加重組白介素35蛋白50ng/ml）、高糖+IL-35蛋白組C（25mmol/L D-葡萄糖加重組白介素35蛋白100ng/ml）。利用RT-PCR測定ARPE-19細胞中IL-35及

4、其受體各亞基、IL-6、MCP-1及VEGF mRNA的表達,利用CCK8測定各組細胞活力，ELISA測定各組細胞上清中IL-6、MCP-1及VEGF的表達水平。
　　結(jié)果：PDR患者血清中白介素35蛋白表達水平顯著降低(P＜0.05), PDR組患者玻璃體液中IL-35蛋白表達水平較對照組顯著降低（P＜0.001)。而白介素35蛋白表達水平在DWR組患者及NPDR組患者血清中表達水平與對照組無顯著性差異（P＞0.05）。體外實驗