內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激介導的TXNIP在實驗性SAH后早期腦損傷發(fā)生機制的研究.pdf

1、目的：作為體內(nèi)重要的促氧化蛋白，硫氧還蛋白相互作用蛋白（Thioredoxin-interacting protein，TXNIP）可以在多種應激狀態(tài)下導致細胞凋亡和炎癥發(fā)生。課題組前期研究表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激（Endoplasmic eticulum stress，ER stress）介導的腦細胞死亡是加重蛛網(wǎng)膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）后早期腦損傷（early brain injury， EBI）的

2、重要機制。近來的研究發(fā)現(xiàn)，ER stress可以在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)TXNIP的表達。因此本研究擬對ER stress和TXNIP進行干預，以期闡明ER stress-TXNIP信號通路參與SAH后EBI的發(fā)生過程。
　　方法：采用SD雄性大鼠血管內(nèi)穿刺法建立SAH模型，檢測TXNIP及下游因子SAH后72h內(nèi)動態(tài)變化；采用TXNIP siRNA、TXNIP抑制劑Resveratrol、PERK抑制劑GSK2656157、IRE

3、1α抑制劑STF-083010對 TXNIP及 ER stress感受體進行干預。Western blot檢測干預前后TXNIP及通路相關(guān)因子表達變化，三維熒光檢測腦細胞TXNIP定位，熒光TUNEL檢測TXNIP在凋亡細胞中的定位、干預前后凋亡細胞數(shù)量變化情況，同時評估死亡率、SAH評分、神經(jīng)功能評分、腦水腫、血腦屏障通透性變化情況。
　　結(jié)果： SAH后 TXNIP及下游相關(guān)因子在出血早期即出現(xiàn)增高（0.729±0.548，P

4、<0.05）。熒光共聚焦發(fā)現(xiàn)TXNIP在神經(jīng)元、小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞表達，熒光TUNEL發(fā)現(xiàn)TXNIP與凋亡細胞出現(xiàn)共定位。對 TXNIP及 ER stress干預后，TXNIP的表達被顯著抑制(P<0.05)，并伴隨下游凋亡因子和炎癥因子釋放減少(P<0.05)，SAH大鼠預后得到改善。
　　結(jié)論：作為體內(nèi)重要的命運調(diào)控細胞器，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與多種死亡調(diào)節(jié)機制。本研究證實ER stress介導的TXNIP表達能明顯加重細胞凋亡發(fā)生