紫金牛、鐵掃帚對COPD大鼠氣道DCN、Smad7的干預及對COPD穩(wěn)定期的療效.pdf

1、目的:
　　動物試驗:探索苗藥紫金牛、鐵掃帚通過DCN、Smad7調控TGF-Smads信號通路干預COPD大鼠氣道重塑的作用機制，觀察不同劑量苗藥對COPD大鼠的療效，以探討DCN和TGF-Smads信號通路在氣道重塑中所扮演的角色。
　　臨床研究:觀察苗藥紫金牛、鐵掃帚對COPD穩(wěn)定期肺腎氣陰兩虛、痰瘀互阻證的臨床療效，為探明苗藥紫金牛、鐵掃帚防治COPD的作用機制提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:
　　動物試

2、驗:將60只健康雄性SD大鼠隨機分為健康對照組12只，COPD模型組48只，模型組利用熏香煙加氣管內注入脂多糖的方法制作COPD大鼠模型，造模結束后隨機選取8只COPD模型大鼠及2只健康大鼠行病理切片檢查（蘇木精-伊紅染色，HE染色）做模型鑒定。將造模成功的剩余40只大鼠隨機分為4組:COPD空白組、苗藥高劑量組、苗藥中劑量組和苗藥低劑量組，每組各10只。對各苗藥組分別對應給予高、中、低劑量苗藥紫金牛、鐵掃帚灌胃干預治療一個月，COPD

3、空白組予滅菌生理鹽水灌胃干預治療一個月。運用HE染色觀察治療后各組大鼠肺組織病理改變;用蛋白質印跡法(Western Blot)檢測治療后各組大鼠肺組織中TGF-β1、Smad7、DCN的表達;通過Pearson相關系數(shù)分析TGF-β1、Smad7、DCN蛋白之間的相關性。
　　臨床研究:選取符合納入標準的COPD穩(wěn)定期肺腎氣陰兩虛、痰瘀互阻病例68例，按數(shù)字隨機表分為西藥對照組（34例）和苗藥治療組（34例），兩組均按照COPD

4、指南和GOLD標準對COPD穩(wěn)定期患者的指導管理和治療，囑其戒煙、遠離煙霧和職業(yè)暴露環(huán)境、加強體育鍛煉等。西藥對照組予舒利迭吸入治療，每次1噴，每日早晚各1次。苗藥治療組在西藥對照組基礎上予苗藥紫金牛、鐵掃帚煎劑口服，每次100ml，每日3次，飯后1小時服用。兩組患者均以3個月為1個療程。觀察治療前后兩組患者單個癥狀、體征的中醫(yī)證候積分、肺功能、CAT評分、6分鐘步行距離(6MWD)、血氧飽和度(SPO2)下降值等指標，綜合評判苗藥紫金

5、牛、鐵掃帚治療COPD穩(wěn)定期患者的中醫(yī)證候療效及患者生活質量、運動耐量、肺功能的改善情況。記錄研究期間因用藥所發(fā)生的不良反應事件，評價苗藥紫金牛、鐵掃帚的藥物安全性。
　　結果:
　　動物試驗:
　　1.HE染色顯示:COPD模型組大鼠肺組織出現(xiàn)與COPD相應的病理改變，各苗藥組大鼠肺組織病理改變均較COPD空白組有所改善，尤以苗藥高劑量組改善最為明顯。各苗藥組大鼠癥狀均有改善，尤以高劑量組癥狀改善最為明顯。
　

6、　2.經(jīng)苗藥紫金牛、鐵掃帚干預治療后，Smad7、TGF-β1蛋白表達苗藥各組與COPD空白組之間均有明顯差異;DCN蛋白表達苗藥高、中劑量組與COPD空白組均有明顯差異，苗藥低劑量組與COPD空白組之間無明顯差異;苗藥高、中劑量組之間Smad7、DCN、TGF-β1蛋白表達均無明顯差異，但苗藥高劑量組Smad7、DCN蛋白表達均數(shù)高于苗藥中劑量組、TGF-β1蛋白表達均數(shù)低于苗藥中劑量組。
　　3.COPD大鼠模型肺組織中Sma

7、d7與DCN呈正性相關，二者與TGF-β1均呈負性相關。
　　臨床研究:
　　1.兩組患者治療前后肺功能比較:兩組治療前后FEV1/FVC％、FEV1％預計值組內比較均有顯著差異;治療后組間比較均有差異。
　　2.兩組患者治療前后CAT評分比較:兩組治療前后組內比較均有顯著差異;治療后組間比較亦有明顯差異。
　　3.兩組患者治療前后6MWD及SP02下降值比較:兩組治療前后6MWD及SPO2下降值組內比較均有明顯

8、差異;治療后二者組間比較均有差異。
　　4.兩組患者治療前后單個癥狀、體征積分比較:兩組治療前后喘息、氣短、乏力、自汗、咳嗽咳痰、易感冒、腰膝酸軟、口唇紫組內比較均有明顯差異;治療后組間對比除腰膝酸軟、乏力外，其余癥狀、體征均有差異。
　　5.兩組治療前后中醫(yī)證候療效比較有差異。
　　6.兩組治療過程中均無明顯不良事件發(fā)生。
　　結論:
　　動物試驗:
　　1.煙熏加氣管內注射脂多糖導致實驗大鼠出現(xiàn)C

9、OPD病理性改變。各苗藥組肺組織形態(tài)較COPD空白組有所改善，尤以苗藥高劑量組最為明顯。經(jīng)苗藥治療后，COPD大鼠模型癥狀均有所緩解，尤以苗藥高劑量組緩解最為明顯。
　　2.在COPD大鼠模型組肺組織中，TGF-β1含量顯著升高，DCN、Smad7顯著降低;經(jīng)苗藥紫金牛、鐵掃帚干預治療后，苗藥治療組TGF-β1明顯降低，DCN、Smad7明顯升高，綜合比較后發(fā)現(xiàn)尤以苗藥高劑量組變化最為明顯，說明苗藥高劑量組療效最佳。
　　3

10、.TGF-β1與Smad7、DCN均呈負性相關，Smad7與DCN呈正性相關，紫金牛、鐵掃帚治療COPD大鼠模型可能與以下機制有關:(1)通過上調Smad7在COPD大鼠模型體內的表達，保證TGF-Smads信號傳導通路的正常作用，抑制TGF-β1對氣道重塑的促進作用。(2)上調COPD大鼠模型體內TGF-β拮抗劑DCN的表達，使TGF-β1失活，并解除了其過度表達對Smad7的抑制作用，DCN與Smad7相互協(xié)同、相互促進，并促進TG

11、F-Smad7信號傳導通路的恢復，二者起到共同抑制TGF-β1過表達的作用，對COPD大鼠模型的氣道重塑起到改善作用。
　　臨床研究:
　　1.兩組患者治療后FEV1/FVC％、FEV1％預計值均有改善，苗藥治療組改善優(yōu)于西藥對照組，說明苗藥紫金牛、鐵掃帚能在一定程度上改善COPD穩(wěn)定期患者的肺功能。
　　2.兩組患者治療后CAT評分、6MWD、SPO2下降值均有改善，但苗藥治療組改善較為明顯，說明苗藥紫金牛、鐵掃帚能